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晓风眷月

金虫 (正式写手)

[求助] HPLC样品出峰与流动相的关系 已有6人参与

前段时间用HPLC做个样品,这个样品在水中是可溶的,在乙腈中比较难溶,然后师姐在做这个样的时候跟我说,要把水的比例调大些,更容易出峰,此时,我有点困惑,因为一直都认为在反相柱里,乙腈这种相比水来说极性小的比例越大不是应该更早出峰么,而在分离两种化合物的时候,在确定用反相柱之后,出峰顺序不也应该只是跟化合物本身的极性有关,而与流动相比例是无关的么?我认识有什么误区么?求解
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感性大于理性的理科人
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hudreamy

铁杆木虫 (职业作家)

你师姐的意思是增加溶解性,所以水的比例高些,这样也防止你的样品在柱子中析出来把柱子堵了,出峰时间和流动相是肯定有关系的,你可以实践一下,用不同的流动相比例走一下就知道了
7楼2015-08-03 00:03:04
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猫猫爱吃小鱼

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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样品出峰时间与色谱柱也有关系
2楼2015-07-31 17:12:15
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ethernet3399

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
你的认识仅停留在理论上。实际操作时也要考虑到流动相对于物质的溶解度。试想,如果一个物质在流动相中不溶解,会出峰吗?第二,出峰顺序理论上与化合物极性有关,但是换不同的色谱柱可能峰位颠倒,这又作何解释呢?所以理论是一方面,但是不可以绝对化,毕竟是实验科学。

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-08-02 05:56:01
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727701445

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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出峰时间当然和流动相的比例有关啊,流动相的比例不同或者比例阀出故障,出峰时间都会改变的
4楼2015-08-02 15:44:35
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