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银虫 (小有名气)

[求助] 液相基线相关问题 已有1人参与

大家好,最近在做有关物质。样品是用50%甲醇溶解定容。色谱条件是    仪器:Agilent1290;色谱柱: C8柱;流动相:A相 甲醇-B相 pH6.8磷酸缓冲盐 ;洗脱程序:
T(min)        0        15        45        55        60        65        85
CB%               15     30        50        85        85        15        15   
检测波长:231nm; 柱温:35℃;流速:1ml/min ;进样量:20μL。
当进样50%甲醇(做溶剂空白)时,谱图是这样的(图1和图2)。进样品是(图3和图4)。走溶剂空白是在50-70min这时间段有好几个峰,而样品也有好几个峰,这样证明不了样品那时间段的峰只是由于溶剂或者色谱梯度引起的。不同时间跑出来的图都这样。怎么证明样品那个时间段的峰只是由于溶剂变化引起的?这个色谱条件是否可行?大家有什么建议没,谢谢啦。

液相基线相关问题
图1进样50%甲醇.jpg


液相基线相关问题-1
图2进样50%甲醇放大谱图.png


液相基线相关问题-2
图3进样品.png


液相基线相关问题-3
图4进样品放大谱图.png
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迷你zt

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我现在也出现了这种情况,但是我的色谱条件和你不一样:0.01mol/L磷酸盐缓冲液和乙腈,也是走梯度,波长:220nm;色谱柱:C18长柱; 柱温:30℃;流速:1ml/min ;进样量:5μL。无论是走空白溶剂还是样品,后面都会出现这样的杂峰,我更换了流动相(盐换成水)也是没什么效果,色谱柱换成C8长柱,稍微有些变化,但是杂峰还是有。氰基柱也有试过,杂峰会好很多,所以我怀疑是不是由于色谱柱引起的。我看到进口标准,有用C16柱,但是我们没有这样的柱子,所以也不知道效果怎么样。
2楼2015-07-17 09:22:51
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