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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » TA克隆相关问题
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qaz139687

新虫 (小有名气)

[求助] TA克隆相关问题 已有8人参与

PCR产物用PMD 19T载体  16℃过夜连接后，与DH5感受态细胞转化，涂平板，挑菌，液体培养基培养后，菌液变浑浊，然后做了菌落PCR有目的条带，送公司测序，公司说菌落浓度太低，这是为什么？是我感受态的问题吗
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1楼 2015-07-04 23:14:09
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wuwenmei

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我现在碰到应该和你一样的问题吧，把目的序列连上19T后，菌液PCR，和提取质粒PCR都P出来条带，送去测序就是测不出来，正向和反向都试过了，就是测不出来，我都不知道怎么回事，哎，！
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下雨天就算没有伞，我也要学会努力奔跑！
16楼2015-07-07 17:21:28
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qaz139687

新虫 (小有名气)
来个人指点指点啊
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2楼2015-07-05 13:25:08
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a13515517892

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与，应助指数 +1
公司可以帮你转化了之后再抽提质粒测序的，估计是他们不愿意
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3楼2015-07-05 14:42:12
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ppppppppp

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
送测序的菌需要继续培养的，只是浑浊肯定不行，因为他们也要先抽质粒再测序的。菌落pcr和测序对菌浓度要求应该不一样的。
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初来乍到，请多指教
4楼2015-07-05 14:56:56
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