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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 测多酚氧化酶活性是背景颜色太深
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江小萍

银虫 (正式写手)

[求助] 测多酚氧化酶活性是背景颜色太深

测多酚氧化酶的抑制性，抑制剂是酸性试剂，但是底物（邻苯二酚）在酸性条件下显示并且颜色很深，所以在测od值的时候发现对照组颜色比实验组的颜色要深，怎么处理呢？
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1楼 2015-06-30 16:53:47
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江小萍

银虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 苏苏_22 at 2016-06-07 17:33:02
嗯嗯，我也打算用分光光度计连续测，要是我也不设空白的话怎么直接测呀，分光光度计会显示一个数然后往上涨吗？还有我想问一下你们用酶标仪测的话加酶的时间不是也会有一定的误差吗？
...

酶标仪是自动连续测的，就是我把酶和底物加入96孔板后它会自动一分钟测一次～这样随着反应时间延长吸光度改变

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6楼2016-06-07 23:46:07
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苏苏_22

新虫 (初入文坛)
楼主，你好，你现在问题解决了吗？我现在也是测酶活抑制实验，而且抑制剂有颜色，测的吸光值更大了，有影响吗？还有楼主是怎么测的多酚氧化酶的活性呀，我不知道怎么设空白管了，就是觉得自己设计的有问题，所以想知道楼主是怎么设计的空白管呢？

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2楼2016-06-06 20:23:34
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江小萍

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 苏苏_22 at 2016-06-06 20:23:34
楼主，你好，你现在问题解决了吗？我现在也是测酶活抑制实验，而且抑制剂有颜色，测的吸光值更大了，有影响吗？还有楼主是怎么测的多酚氧化酶的活性呀，我不知道怎么设空白管了，就是觉得自己设计的有问题，所以想知 ...

我是用的酶标仪连续测了点，用这段时间内色差来计算酶活性，所以就没有设空白

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3楼2016-06-06 23:40:45
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苏苏_22

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 江小萍 at 2016-06-06 23:40:45
我是用的酶标仪连续测了点，用这段时间内色差来计算酶活性，所以就没有设空白
...

嗯嗯，谢啦！我之前设的空白是PBS和邻苯二酚的混合溶液，但是邻苯二酚自氧化，觉得好像也不能用来调零，所以不知道怎么设空白了，不过谢谢你！

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4楼2016-06-07 13:34:09
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