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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请教：转化之后大肠杆菌必须马上加培养基复苏吗
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soarhighman

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教：转化之后大肠杆菌必须马上加培养基复苏吗 已有8人参与

热激转化之后的大肠杆菌能在四度放一段时间再加LB液体培养基进行细胞复苏吗？谢谢！
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1楼 2015-06-24 12:01:04
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

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感谢参与，应助指数 +1
不考虑转化效率的话，放几小时没问题的。
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2楼2015-06-24 13:02:56
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halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥？

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感谢参与，应助指数 +1
复苏只要一小时而已，你这是有急事吗？
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现在我们能做的就是努力努力再努力
3楼2015-06-24 15:03:26
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恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不放冰箱，我们做原核蛋白表达时，热激后是要放在冰水浴中3min稳定一下，然后再放到LB培养基中。
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早上一副睡不醒的样子，下午一副没睡醒的样子，晚上一副打了鸡血的样子！
4楼2015-06-25 10:09:57
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chenjihaha

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没事的！可以，放过，放了一下午，晚上复苏的。
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有好东西大家就分享！
5楼2015-06-25 10:16:36
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人车

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我倒是没放过 不过既然是实验 你可以试试嘛
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6楼2015-06-25 10:50:54
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viki_MDK

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
效率稍微下降点罢了，一般没问题，如果直接拿提取质粒转化的话，直接涂抗性板都没事。如果是连接产物的话，最好还是复苏下，毕竟连接产物里，完整的质粒相对少很多。
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7楼2015-06-25 11:19:19
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qq263671900

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by halfbeer at 2015-06-24 15:03:26
复苏只要一小时而已，你这是有急事吗？

同意
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8楼2015-06-26 07:13:18
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yangjingjing

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
阔以啊，但是你涂板之后长出的菌会很多，而且几乎全假阳性~~~
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努力打败一切
9楼2015-06-26 10:38:58
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b6122

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你还不如冰里放几分钟后直接铺板。更省事，虽然效率稍微低点。
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10楼2015-06-27 00:42:27
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