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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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15150681606

银虫 (小有名气)

[求助] ELISA测组织样本时裂解液的选择 已有2人参与

我要做PIIINP的elisa,双抗体夹心。我希望测小鼠心脏,说明书上说用PBS匀浆。
但我前面为了测Caspase-3活性,使用了碧云天Caspase-3活性试剂盒自带的裂解液把心脏匀浆并离心取了上清,
那么问题来了:这些上清液可以直接做elisa么?会有影响么?
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swlsangon

木虫 (小有名气)

快乐的木虫

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你确定蛋白在上清里面吗?要是确定的话,可以做。
生命在于运动
2楼2015-06-23 16:02:10
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绯红誓言

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果是裂解液上清的话,建议先用BCA测一下总蛋白浓度,跑个SDS-page确定一下目的蛋白是否存在,以及大概的量和浓度。
对于他是否能直接用在夹心ELISA中,这取决于你提取的上清中是否存在影响夹心ELISA中其他组份的物质。譬如说有些酶会对HRP起催化作用,有些试剂会抑制HRP活性等等!
这个试一下就知道了!没人能凭经验就告诉你,试了就是你的经验!
3楼2015-06-23 22:58:21
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15150681606

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by swlsangon at 2015-06-23 16:02:10
你确定蛋白在上清里面吗?要是确定的话,可以做。

做过考马斯亮蓝定量。。
4楼2015-06-24 09:22:38
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