24小时热门版块排行榜    

查看: 1875  |  回复: 4

旭竹0907

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 抗体特异性检测方法 已有1人参与

请教各位大侠,文章中,reviewer 问 How was the specificity of the antibody evaluated? Cross reactivity, non-specific binding etc? 如何回答,有没有相关文献支持啊!另外, 刚做好的抗体,如何检测其特异性和效价。谢谢!
回复此楼
谁能要耐得住寂寞谁就能成就梦想
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kx444555

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-05-25 23:04:29
抗体是自己做的吗?从公司买的话的是有资料的
自己做的话,效价的测定需要间接ELISA测定,按比例稀释抗体,同时做个阴性对照,只要稀释比的OD值大于阴性的2倍就认定它是阳性,这个就是效价,特异性的检测你需要找个细胞株做成裂解液,WB看看有没有杂带
星陈代谢
2楼2014-05-25 20:19:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

旭竹0907

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kx444555 at 2014-05-25 20:19:11
抗体是自己做的吗?从公司买的话的是有资料的
自己做的话,效价的测定需要间接ELISA测定,按比例稀释抗体,同时做个阴性对照,只要稀释比的OD值大于阴性的2倍就认定它是阳性,这个就是效价,特异性的检测你需要找个 ...

您好!感谢您的回复,抗体是我们自己做的,我们做WB检测了,因为是多抗,有杂带,购买的抗体也一样,原因可能是因为这个蛋白有多个isoform。再请教一下,间接ELISA测定方法有protocol,及相关文献支持么,请发一份给我,谢谢!
谁能要耐得住寂寞谁就能成就梦想
3楼2014-05-25 21:24:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kx444555

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
旭竹0907: 金币+15, ★★★★★最佳答案 2014-05-27 18:06:53
引用回帖:
3楼: Originally posted by 旭竹0907 at 2014-05-25 21:24:42
您好!感谢您的回复,抗体是我们自己做的,我们做WB检测了,因为是多抗,有杂带,购买的抗体也一样,原因可能是因为这个蛋白有多个isoform。再请教一下,间接ELISA测定方法有protocol,及相关文献支持么,请发一份 ...

1 有杂带也是正常的,要确定那一条是特异性条带,你最好用你的蛋白把血清BLOCK一下做阴性对照,然后正常血清跟BLOCD后的血清同时做WB,如BLOCK后的在预测位置变弱或者没有了,就说明这条带是特异性的,
2 效价的测定的通用方法都是这样的,文献暂时没有,你上GOOGLE学术上搜索一下吧
星陈代谢
4楼2014-05-26 08:36:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

旭竹0907

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by kx444555 at 2014-05-26 08:36:22
1 有杂带也是正常的,要确定那一条是特异性条带,你最好用你的蛋白把血清BLOCK一下做阴性对照,然后正常血清跟BLOCD后的血清同时做WB,如BLOCK后的在预测位置变弱或者没有了,就说明这条带是特异性的,
2 效价的测 ...

非常感谢!
谁能要耐得住寂寞谁就能成就梦想
5楼2014-05-27 18:07:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 旭竹0907 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 什么时候开奖? +4 CrisMessi 2026-08-18 4/200 2026-08-19 00:53 by gatelove
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 27/1350 2026-08-18 21:44 by Noways
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +3 瞬息宇宙 2026-08-15 3/150 2026-08-18 21:40 by xiaohuixin
[基金申请] 朋友圈看到的 +4 wangzilk 2026-08-18 5/250 2026-08-18 19:25 by wangzilk
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +51 医学老男孩 2026-08-13 110/5500 2026-08-18 19:07 by icerianxia
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +8 基诺咪客 2026-08-17 11/550 2026-08-18 17:13 by 悠然熊猫
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +9 yuleib84 2026-08-18 10/500 2026-08-18 16:52 by archvillain
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +4 Tide man 2026-08-14 5/250 2026-08-18 11:35 by Tide man
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
信息提示
请填处理意见