24小时热门版块排行榜    

查看: 1708  |  回复: 4

旭竹0907

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 抗体特异性检测方法 已有1人参与

请教各位大侠,文章中,reviewer 问 How was the specificity of the antibody evaluated? Cross reactivity, non-specific binding etc? 如何回答,有没有相关文献支持啊!另外, 刚做好的抗体,如何检测其特异性和效价。谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

谁能要耐得住寂寞谁就能成就梦想
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kx444555

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-05-25 23:04:29
抗体是自己做的吗?从公司买的话的是有资料的
自己做的话,效价的测定需要间接ELISA测定,按比例稀释抗体,同时做个阴性对照,只要稀释比的OD值大于阴性的2倍就认定它是阳性,这个就是效价,特异性的检测你需要找个细胞株做成裂解液,WB看看有没有杂带
星陈代谢
2楼2014-05-25 20:19:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

旭竹0907

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kx444555 at 2014-05-25 20:19:11
抗体是自己做的吗?从公司买的话的是有资料的
自己做的话,效价的测定需要间接ELISA测定,按比例稀释抗体,同时做个阴性对照,只要稀释比的OD值大于阴性的2倍就认定它是阳性,这个就是效价,特异性的检测你需要找个 ...

您好!感谢您的回复,抗体是我们自己做的,我们做WB检测了,因为是多抗,有杂带,购买的抗体也一样,原因可能是因为这个蛋白有多个isoform。再请教一下,间接ELISA测定方法有protocol,及相关文献支持么,请发一份给我,谢谢!
谁能要耐得住寂寞谁就能成就梦想
3楼2014-05-25 21:24:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kx444555

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
旭竹0907: 金币+15, ★★★★★最佳答案 2014-05-27 18:06:53
引用回帖:
3楼: Originally posted by 旭竹0907 at 2014-05-25 21:24:42
您好!感谢您的回复,抗体是我们自己做的,我们做WB检测了,因为是多抗,有杂带,购买的抗体也一样,原因可能是因为这个蛋白有多个isoform。再请教一下,间接ELISA测定方法有protocol,及相关文献支持么,请发一份 ...

1 有杂带也是正常的,要确定那一条是特异性条带,你最好用你的蛋白把血清BLOCK一下做阴性对照,然后正常血清跟BLOCD后的血清同时做WB,如BLOCK后的在预测位置变弱或者没有了,就说明这条带是特异性的,
2 效价的测定的通用方法都是这样的,文献暂时没有,你上GOOGLE学术上搜索一下吧
星陈代谢
4楼2014-05-26 08:36:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

旭竹0907

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by kx444555 at 2014-05-26 08:36:22
1 有杂带也是正常的,要确定那一条是特异性条带,你最好用你的蛋白把血清BLOCK一下做阴性对照,然后正常血清跟BLOCD后的血清同时做WB,如BLOCK后的在预测位置变弱或者没有了,就说明这条带是特异性的,
2 效价的测 ...

非常感谢!
谁能要耐得住寂寞谁就能成就梦想
5楼2014-05-27 18:07:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 旭竹0907 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研调剂 +5 小蜡新笔 2026-03-26 5/250 2026-03-26 14:36 by njzyff
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +13 adaie 2026-03-19 13/650 2026-03-26 14:05 by 小小麦片
[考研] 总分293求调剂 +6 加一一九 2026-03-25 8/400 2026-03-26 13:30 by yujianx
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +5 曼111 2026-03-24 6/300 2026-03-26 13:04 by 13756423260
[考研] 315分求调剂 +5 26考研上岸版26 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:11 by laoshidan
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
[考研] 299求调剂 +7 某某某某位 2026-03-21 8/400 2026-03-25 20:34 by 热情沙漠
[考研] 290分调剂求助 +3 吉祥止止陈 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:58 by barlinike
[考研] 333求调剂 +6 87639 2026-03-21 11/550 2026-03-25 16:17 by 87639
[考研] 284求调剂 +15 Zhao anqi 2026-03-22 15/750 2026-03-25 12:51 by wht0531
[考研] B区考研调剂 +4 yqdszhdap- 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:51 by baoball
[考研] 求调剂 +5 林之夕 2026-03-24 5/250 2026-03-24 17:16 by dick_runner
[考研] 求调剂 +6 研研,接电话 2026-03-24 7/350 2026-03-24 17:01 by barlinike
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
[考研] 材料/农业专业,07/08开头均可,过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪!?!
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境,总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 一志愿华中农业071010,总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 一志愿中南化学(0703)总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 一志愿华中科技大学071000,求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
信息提示
请填处理意见