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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 双链RNA的制备
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angnay

铜虫 (著名写手)

[求助] 双链RNA的制备 已有1人参与

大家好，最近想做体外RNA解旋酶的活性测试工作，定制了互补的两条RNA单链，18-25bp，想问一下制备双链RNA是将两条单链加到一起后高温变性室温退火就可以吗？
ssRNA1：CCCAAGAACCCAAGGAAC
ssRNA2:TGGTCGCGGCCCGCCCTCGTCGTCC
均为5-3
分子生物不是很懂，谢谢大家了。
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1楼 2015-06-19 08:22:31
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王平阳

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
angnay(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-06-21 18:45:49
angnay: 金币+4, ★★★★★最佳答案 2015-06-23 16:44:07
由单链RNA生成双链RNA只需要将两条单链RNA等摩尔比混合，75℃反应3min，再缓慢降至室温即可
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没有做不到，只有想不到！
2楼2015-06-19 20:58:50
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angnay

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 王平阳 at 2015-06-19 20:58:50
由单链RNA生成双链RNA只需要将两条单链RNA等摩尔比混合，75℃反应3min，再缓慢降至室温即可

谢谢啊 怎么检测是生成了双链RNA呢？跑电泳就行吗？
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3楼2015-06-23 16:44:45
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王平阳

金虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-06-23 22:01:14
引用回帖:
3楼: Originally posted by angnay at 2015-06-23 16:44:45
谢谢啊 怎么检测是生成了双链RNA呢？跑电泳就行吗？...

可以先用RNase H消化，该酶只消化单链RNA，消化之后再电泳或者其他方法检测比较好
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没有做不到，只有想不到！
4楼2015-06-23 21:09:35
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angnay

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 王平阳 at 2015-06-23 21:09:35
可以先用RNase H消化，该酶只消化单链RNA，消化之后再电泳或者其他方法检测比较好...

谢谢~~是分子的新手 多谢指导~~
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5楼2015-06-25 16:26:22
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