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新虫 (初入文坛)

[交流] 7.2Kb的质粒转化BL21不长,但对照都长了已有1人参与

2238kb基因转化到T19载体然后转化Rosetta成功,菌液PCR和测序都表示没问题,然后用not1和BamH1双酶切表达载体pGEX-4T-1和Rosetta的质粒,用Takala的solution1过夜16℃连接,转化2次BL21都没有长,后来一次做了两个对照,一个是4T-1转BL21,一个是连接液转DH5α,这两个对照都长了。如今正对DH5α进行菌液PCR,这究竟是什么情况,弄不懂了!新手没有金币,望各位大神指导呀!
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仁者努力

铁虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你用的什么抗性的培养皿啊
加油
2楼2015-06-16 18:00:45
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280261300

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 仁者努力 at 2015-06-16 18:00:45
你用的什么抗性的培养皿啊

AMP呢
3楼2015-06-16 21:38:11
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280261300

新虫 (初入文坛)

能不能把重组DH5α的质粒提出来再转化到BL21里面去,效率会不会高一点呀?感受态是自己做的,不知道效率怎么样。
4楼2015-06-16 21:39:24
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