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qian94264

新虫 (初入文坛)

[求助] 新手上路~这个结果可能有哪些原因? 已有2人参与

刚到实验室,还不太熟~
老板的实验用的是大鼠含药血清(中药复方),灌胃7天,末次灌胃2小时取血~
用的甲醇,HPLC是其他师姐帮做的(本人临床的 不会)~
结果四组都一样,各位大神帮我分析下啥原因,下一步怎么办啊~怎么跟老板交代~
图1为原药液
图2从上至下为: 中;低;高 ;空白组血清色谱图

新手上路~这个结果可能有哪些原因?
图片1.jpg


新手上路~这个结果可能有哪些原因?-1
图片2.jpg
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liuhaifen

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
放置时间可能会对血液里药物的浓度有影响,这个需要你自己去排查哟,同时也不确定你的原料药到底是什么,在低温下的代谢情况如何,要么去查文献找到这些药物在低温下的消耗量,要么就重新做一组作为比对实验。
6楼2015-06-12 10:06:05
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普通回帖

archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

1. 血清是怎么处理的?
2. 灌了七天就取了一次血?
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
2楼2015-06-11 21:24:56
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qian94264

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by archbishop at 2015-06-11 21:24:56
1. 血清是怎么处理的?
2. 灌了七天就取了一次血?

这个实验是师姐们做了一半,血清是2小时后处死取的腹主动脉血,仅取了一次,有可能还不止两小时。我们接手时候血清保存在-80°冰箱里,放了挺久了
3楼2015-06-11 21:53:11
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

引用回帖:
3楼: Originally posted by qian94264 at 2015-06-11 21:53:11
这个实验是师姐们做了一半,血清是2小时后处死取的腹主动脉血,仅取了一次,有可能还不止两小时。我们接手时候血清保存在-80°冰箱里,放了挺久了...

我说的处理是指前处理,是用什么方法处理的血清?
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
4楼2015-06-11 21:58:13
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qian94264

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by archbishop at 2015-06-11 21:58:13
我说的处理是指前处理,是用什么方法处理的血清?...

我不太懂啊 有说错的见谅~离心后取上清,400ul+400ul甲醇

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2015-06-12 08:30:49
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

引用回帖:
5楼: Originally posted by qian94264 at 2015-06-12 08:30:49
我不太懂啊 有说错的见谅~离心后取上清,400ul+400ul甲醇
...

可能有基质的影响,再就是浓度太低用紫外检测不出来。楼上说的很对,你要排除一下那些因素。
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
7楼2015-06-12 11:25:22
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你首先需要确定药液加到血浆里仍然可以被检测出来。一般测血浆都是要做些前处理的,至少也有蛋白沉淀的步骤。你需要确定这些前处理不会把要测的东西搞丢了。

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2015-06-12 13:40:11
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qian94264

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by superyeast at 2015-06-12 13:40:11
你首先需要确定药液加到血浆里仍然可以被检测出来。一般测血浆都是要做些前处理的,至少也有蛋白沉淀的步骤。你需要确定这些前处理不会把要测的东西搞丢了。

应该不会,您的意思是我的药物成分可能与蛋白结合然后被沉淀了?~我看有人做空白血清+药物组是为了什么目的?

[ 发自小木虫客户端 ]
9楼2015-06-12 14:56:44
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by qian94264 at 2015-06-11 22:56:44
应该不会,您的意思是我的药物成分可能与蛋白结合然后被沉淀了?~我看有人做空白血清+药物组是为了什么目的?
...

空白血清加药物正是在做方法验证,是你在上动物之前应该做的。

[ 发自小木虫客户端 ]
10楼2015-06-13 03:55:19
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