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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 新手上路~这个结果可能有哪些原因？
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qian94264

新虫 (初入文坛)

[求助] 新手上路~这个结果可能有哪些原因？ 已有2人参与

刚到实验室，还不太熟~
老板的实验用的是大鼠含药血清（中药复方），灌胃7天，末次灌胃2小时取血~
用的甲醇，HPLC是其他师姐帮做的（本人临床的 不会）~
结果四组都一样，各位大神帮我分析下啥原因，下一步怎么办啊~怎么跟老板交代~
图1为原药液
图2从上至下为: 中;低;高 ;空白组血清色谱图

新手上路~这个结果可能有哪些原因？
图片1.jpg


新手上路~这个结果可能有哪些原因？-1
图片2.jpg
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1楼 2015-06-11 21:04:55
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

liuhaifen

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
放置时间可能会对血液里药物的浓度有影响，这个需要你自己去排查哟，同时也不确定你的原料药到底是什么，在低温下的代谢情况如何，要么去查文献找到这些药物在低温下的消耗量，要么就重新做一组作为比对实验。
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6楼2015-06-12 10:06:05
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普通回帖

archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
1. 血清是怎么处理的？
2. 灌了七天就取了一次血？
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
2楼2015-06-11 21:24:56
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qian94264

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by archbishop at 2015-06-11 21:24:56
1. 血清是怎么处理的？
2. 灌了七天就取了一次血？

这个实验是师姐们做了一半，血清是2小时后处死取的腹主动脉血，仅取了一次，有可能还不止两小时。我们接手时候血清保存在-80°冰箱里，放了挺久了
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3楼2015-06-11 21:53:11
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
引用回帖:
3楼: Originally posted by qian94264 at 2015-06-11 21:53:11
这个实验是师姐们做了一半，血清是2小时后处死取的腹主动脉血，仅取了一次，有可能还不止两小时。我们接手时候血清保存在-80°冰箱里，放了挺久了...

我说的处理是指前处理，是用什么方法处理的血清？
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
4楼2015-06-11 21:58:13
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qian94264

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by archbishop at 2015-06-11 21:58:13
我说的处理是指前处理，是用什么方法处理的血清？...

我不太懂啊 有说错的见谅～离心后取上清，400ul+400ul甲醇

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5楼2015-06-12 08:30:49
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
引用回帖:
5楼: Originally posted by qian94264 at 2015-06-12 08:30:49
我不太懂啊 有说错的见谅～离心后取上清，400ul+400ul甲醇
...

可能有基质的影响，再就是浓度太低用紫外检测不出来。楼上说的很对，你要排除一下那些因素。
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
7楼2015-06-12 11:25:22
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你首先需要确定药液加到血浆里仍然可以被检测出来。一般测血浆都是要做些前处理的，至少也有蛋白沉淀的步骤。你需要确定这些前处理不会把要测的东西搞丢了。

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8楼2015-06-12 13:40:11
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qian94264

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by superyeast at 2015-06-12 13:40:11
你首先需要确定药液加到血浆里仍然可以被检测出来。一般测血浆都是要做些前处理的，至少也有蛋白沉淀的步骤。你需要确定这些前处理不会把要测的东西搞丢了。

应该不会，您的意思是我的药物成分可能与蛋白结合然后被沉淀了？～我看有人做空白血清+药物组是为了什么目的？

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9楼2015-06-12 14:56:44
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by qian94264 at 2015-06-11 22:56:44
应该不会，您的意思是我的药物成分可能与蛋白结合然后被沉淀了？～我看有人做空白血清+药物组是为了什么目的？
...

空白血清加药物正是在做方法验证，是你在上动物之前应该做的。

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10楼2015-06-13 03:55:19
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