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酵母做电转时点转杯大小有关系吗
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小橘子2013
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酵母做电转时点转杯大小有关系吗
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最近在做酵母电转化,实验室只有0.4mm点转杯,想问一下需要用多少感受态和线性化后的质粒呢?
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2015-06-08 16:33:14
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luwei13566
at 2015-06-09 18:01:15
电火花出现在杯口还是杯内?你的电转参数是如何设置的?你的DNA和感受太是如何制备的?
...
装100太少了,有电火花是因为你洗得不纯。。。适当增加感受态,话说干嘛用0.4的?买几个0.2的好了,反正可以重复用
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9楼
2015-06-09 20:27:38
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guoqin_shiyin
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我们一般用0.2的或者0.1的,理论上大点影响也不是很多。
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2楼
2015-06-08 19:15:19
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小橘子2013
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2楼
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Originally posted by
guoqin_shiyin
at 2015-06-08 19:15:19
我们一般用0.2的或者0.1的,理论上大点影响也不是很多。
我是想问 每个大小的杯子都有自己的容量吧 电转的话是都要装满吗 如果感受态和质粒不够的话 需要用什么补齐吗 山梨醇可以吗
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3楼
2015-06-08 21:09:58
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小橘子2013
at 2015-06-08 21:09:58
我是想问 每个大小的杯子都有自己的容量吧 电转的话是都要装满吗 如果感受态和质粒不够的话 需要用什么补齐吗 山梨醇可以吗...
一般我们不会装满,装200微升就够了。。。。没必要装满,至于质粒,一般体积控制在5微升和酵母混合。。。感受态细胞多少其实不太重要,多点也没关系。酵母很好转
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4楼
2015-06-08 21:17:52
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