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小蚂蚁521

新虫 (小有名气)

[交流] 霉菌活化培养和保藏 已有4人参与

本人完全新手，实验室之前也没接触过霉菌培养。恳请各位高手帮忙。刚从菌种资源中心米曲霉菌株，是用安瓿管装的少量菌粉。培养米曲霉可以用PDA培养基吗？怎么把买来的菌接到自己制的培养基上啊？还有一些培养方法、注意事项、要求之类的。培养的菌是用来发酵豆瓣的，这方面是不是也有一些标准啊什么的？请各位高手帮忙！或给点相关资料也可以~！
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1楼 2015-06-08 10:27:44
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yancao

金虫 (小有名气)
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霉菌用PDA可以培养，用接种环蘸一下粉末，在平板上划线，长出均落后接到活化培养基中。具体的作法你可以参考一些微生物的书。没有什么特殊的标准，就是你发酵豆瓣肯定是做食品了，要符合食品安全。
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2楼2015-06-23 15:23:17
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小蚂蚁521

新虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by yancao at 2015-06-23 15:23:17
霉菌用PDA可以培养，用接种环蘸一下粉末，在平板上划线，长出均落后接到活化培养基中。具体的作法你可以参考一些微生物的书。没有什么特殊的标准，就是你发酵豆瓣肯定是做食品了，要符合食品安全。

是直接在安管里移取菌种到PDA还是用其他液体培养基活化后再挑取菌落到PDA上培养，

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3楼2015-06-24 12:28:48
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棘白菌素

铜虫 (正式写手)
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3楼: Originally posted by 小蚂蚁521 at 2015-06-24 12:28:48
是直接在安管里移取菌种到PDA还是用其他液体培养基活化后再挑取菌落到PDA上培养，
...

一般菌保中心的做法是采用适当的液体，可以是无菌水，生理盐水或者是液体培养基，先进行重悬，然后，在固体上划线活化之后，再接一点悬液到液体培养基中。基本上两个总会有长出的。
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青春留不住，白发自然生！
4楼2015-06-24 13:48:00
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小蚂蚁521

新虫 (小有名气)
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4楼: Originally posted by 棘白菌素 at 2015-06-24 13:48:00
一般菌保中心的做法是采用适当的液体，可以是无菌水，生理盐水或者是液体培养基，先进行重悬，然后，在固体上划线活化之后，再接一点悬液到液体培养基中。基本上两个总会有长出的。...

太感谢了，我也是打算用两种方法都试一下，希望可以成功，谢谢了！

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5楼2015-06-25 08:36:40
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小蚂蚁521

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 棘白菌素 at 2015-06-24 13:48:00
一般菌保中心的做法是采用适当的液体，可以是无菌水，生理盐水或者是液体培养基，先进行重悬，然后，在固体上划线活化之后，再接一点悬液到液体培养基中。基本上两个总会有长出的。...

按照这样培养3天得到第一代菌，对于用液体培养基活化的接下来是可以接种到斜面上得到第二代菌吗？能否告知下其中详细的步骤呢？盼复

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6楼2015-06-25 08:48:26
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xiejm

铁虫 (初入文坛)
★
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先用生理盐水溶菌粉，再用接种环熏取画平皿分离出单菌落，再摇瓶扩增培养，分取保存菌种。
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7楼2015-06-25 13:23:43
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棘白菌素

铜虫 (正式写手)
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6楼: Originally posted by 小蚂蚁521 at 2015-06-25 08:48:26
按照这样培养3天得到第一代菌，对于用液体培养基活化的接下来是可以接种到斜面上得到第二代菌吗？能否告知下其中详细的步骤呢？盼复
...

可以再转接到斜面，具体步骤都是常规的实验，不知道你不清楚那些地方；
只要能活下来，你也可以再转接一次固体和液体培养基，经过两级活化，如果都顺利的话，你就先把活化来的菌保藏起来，后面慢慢用就好了。
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Keepmov
青春留不住，白发自然生！
8楼2015-06-25 13:25:11
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Keepmov

铁虫 (初入文坛)
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8楼: Originally posted by 棘白菌素 at 2015-06-25 13:25:11
可以再转接到斜面，具体步骤都是常规的实验，不知道你不清楚那些地方；
只要能活下来，你也可以再转接一次固体和液体培养基，经过两级活化，如果都顺利的话，你就先把活化来的菌保藏起来，后面慢慢用就好了。...

你好，我想请问一下，后面将活化的菌种保藏起来这一步，是将活化后的液体培养基中的第三代菌液用甘油保藏起来？接着就可以每次从中取出一点菌液用于实验就行了吗？
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世间安得双全法，不负如来不负卿
9楼2016-03-03 11:17:15
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棘白菌素

铜虫 (正式写手)
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9楼: Originally posted by Keepmov at 2016-03-03 11:17:15
你好，我想请问一下，后面将活化的菌种保藏起来这一步，是将活化后的液体培养基中的第三代菌液用甘油保藏起来？接着就可以每次从中取出一点菌液用于实验就行了吗？...

甘油保藏也可以，长期保藏建议你用固体斜面上的孢子做冻干管保存；甘油的话时间不会太长；不过无论哪种保法，你在用之前一般都要活化至斜面培养基，刮取孢子或者菌丝进行实验，而不是直接接种甘油菌液，
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青春留不住，白发自然生！
10楼2016-03-03 15:29:04
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