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Jane~爱

新虫 (小有名气)

[求助] 有没有大神用真空冷冻干燥方法保藏霉菌菌丝的，有的话大家交流下经验啊 已有5人参与

真空冷冻干燥保藏是否适合保藏霉菌菌丝体？大家怎样将菌丝分装到安瓿管中？分装完成后真空冷冻干燥时，会不会安瓿管中预冻的菌悬液解冻了而此时还未完全抽干，里面液体被抽到安瓿管上臂接触棉塞后会不会易染菌啊？求大神赐教啊，小女不甚感激！
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1楼 2014-05-27 09:25:15
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myx2610

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励应助！ 2014-05-28 22:26:29
我做的是细菌，要收集菌体，先是用冷冻离心机离心菌液，然后收集到离心管里面，放到冰箱里面冻起来，然后拿出来，打开离心管，用锡纸或者是保鲜膜包好，在上面扎几个小孔，用于干燥，然后就可以冷冻干燥了，这样做一般最后的得到的东西都是为了分析成分，已经被冻干的菌体就不会染菌了吧，毕竟已经没有培养基成分残留了
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Jane~爱
2楼2014-05-27 15:39:43
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20093651

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励交流！ 2014-05-28 22:26:45
真菌的不至于用那种方法保种吧，斜面足够了，就算斜面干了也还能活的，真菌生命力强大啊。
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Jane~爱
但行好事，莫问前程
3楼2014-05-27 16:09:06
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Jane~爱

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by myx2610 at 2014-05-27 15:39:43
我做的是细菌，要收集菌体，先是用冷冻离心机离心菌液，然后收集到离心管里面，放到冰箱里面冻起来，然后拿出来，打开离心管，用锡纸或者是保鲜膜包好，在上面扎几个小孔，用于干燥，然后就可以冷冻干燥了，这样做一 ...

你用安瓿管做过吗？一般真空干燥多久它才会干啊？
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4楼2014-05-28 17:20:23
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Jane~爱

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 20093651 at 2014-05-27 16:09:06
真菌的不至于用那种方法保种吧，斜面足够了，就算斜面干了也还能活的，真菌生命力强大啊。

没办法啊，领导说这个保藏时间更久，我们的菌易退化
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5楼2014-05-28 17:21:33
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myx2610

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Jane~爱 at 2014-05-28 17:20:23
你用安瓿管做过吗？一般真空干燥多久它才会干啊？...

没用安瓿瓶做过，一般买来的细菌是用安瓿瓶装的。一般真空干燥七八个小时吧，差不多就干了。
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6楼2014-05-28 20:22:43
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aoying2008

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
霉菌菌丝不适合用冷冻干燥保藏，可以采用25%甘油作为保护剂进行液氮保藏或者-80度保藏。
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7楼2014-05-28 21:00:25
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Jane~爱

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by aoying2008 at 2014-05-28 21:00:25
霉菌菌丝不适合用冷冻干燥保藏，可以采用25%甘油作为保护剂进行液氮保藏或者-80度保藏。

我也知道不适合，因为做了好几次，没放安瓿管中之前菌丝是可以生长的，但放入安瓿管干燥后再活化菌丝就长不起来了。你能告诉我具体的原因吗？这样我也好说服领导说不适合，目前也在查资料找出为什么不适合
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8楼2014-05-29 09:24:47
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xqxqxhxh1

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
霉菌的保藏多用霉菌的孢子保藏, 因为孢子抗逆性强。如果用菌丝冷冻干燥, 菌丝是生长繁殖的细胞, 抗逆性没有孢子强, 应该是要加入保护剂的。
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自己啥都不懂
9楼2014-05-29 10:31:10
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aoying2008

木虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by xqxqxhxh1 at 2014-05-29 10:31:10
霉菌的保藏多用霉菌的孢子保藏, 因为孢子抗逆性强。如果用菌丝冷冻干燥, 菌丝是生长繁殖的细胞, 抗逆性没有孢子强, 应该是要加入保护剂的。

这楼主说的没错。

具体相关的，楼主可以看看《菌种保藏手册》、《微生物菌种保藏技术》这两本专著。
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10楼2014-05-29 13:51:43
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