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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 关于T4 DNA聚合酶补齐粘性末端的求助
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土屋康太

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于T4 DNA聚合酶补齐粘性末端的求助

我最近在构建一个切掉pBI121 35S启动子的载体
35S启动子前后并无切成平末端的酶切位点，我用选的酶是BamHI和HindIII，酶切位点如图：
关于T4 DNA聚合酶补齐粘性末端的求助
左右分别是BamHI和HindIII的酶切位点。根据T4DNA聚合酶的性质“在模板和引物存在的条件下，催化与模板互补的dNTP依次选择性地链接在引物的3'-OH末端上的反应”，可否用于补齐BamHI和HindIII酶切留下的粘性末端？切开的粘性末端已经有3'-OH，那么是不是补齐就不需要“引物”了？？？
用T4 聚合酶补齐这两个粘性末端如果可以，求简单说明；如果不行，求助补齐/削去该粘性末端的方法
新人坐等高手相助~
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1楼 2015-05-11 10:35:11
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