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土屋康太

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于T4 DNA聚合酶补齐粘性末端的求助

我最近在构建一个切掉pBI121 35S启动子的载体
35S启动子前后并无切成平末端的酶切位点,我用选的酶是BamHI和HindIII,酶切位点如图:
关于T4 DNA聚合酶补齐粘性末端的求助
左右分别是BamHI和HindIII的酶切位点。根据T4DNA聚合酶的性质“在模板和引物存在的条件下,催化与模板互补的dNTP依次选择性地链接在引物的3'-OH末端上的反应”,可否用于补齐BamHI和HindIII酶切留下的粘性末端?切开的粘性末端已经有3'-OH,那么是不是补齐就不需要“引物”了???
用T4 聚合酶补齐这两个粘性末端如果可以,求简单说明;如果不行,求助补齐/削去该粘性末端的方法
新人坐等高手相助~
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