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汕头大学海洋科学接受调剂
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ggyy0911

铁虫 (正式写手)

[求助] 毕赤酵母X33每次电转以后就长成黄色菌落,怎么办 已有1人参与

电转之前涂YPD板活化是白色的,形态正常,涂的是公司买的甘油菌保。
  但是一电转结束就不正常了,生长速度很快(周六中午1点涂板,周一早上8点就几乎长满了),而且变成黄色接近透明的菌落,再接着养的话还能长大……做了三次电转了,也重新活化了酵母,每次都这样,而且第二次的结果非常的诡异,我用四种浓度的zeocin筛选,结果高浓度的长满了,而且全是黄色菌,低浓度板却只有寥寥几个,中间还有一些形态正常的。
  如果是污染的话,我同批做的GS115,操作方法相同,操作环境相同,GS115都没污染,X33也没理由污染啊。从YPD板挑菌的时候也是挑的白色形态正常的单克隆。
  现在都不知道该怎么办了,5个样,最早做的那3个样没问题,就剩俩怎么也做不出来,再等下去之前那3个样如果不能表达了我就呵呵呵了。
  在论坛里看见有人说YPD板加amp防止细菌生长的,我想试试,不知道我污染的到底是什么,如果做镜检鉴定该怎么做呢。
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jjwhl

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
做镜检 直接挑菌溶于无菌水,去400倍下显微镜观察 就可以了
2楼2015-04-20 12:33:32
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ggyy0911

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jjwhl at 2015-04-20 12:33:32
做镜检 直接挑菌溶于无菌水,去400倍下显微镜观察 就可以了

用了瑞氏染液,因为刚开始什么都看不到,设了一个正常酵母菌落的对照。请问你镜检过酵母吗?我镜下有很多成团的椭圆蓝紫色,我觉得那是细菌。至于酵母,我都找不到,只感觉正常酵母菌落板上有很多透明的圆,但是瑞氏染液含美兰,酵母不是应该被染色的吗。

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3楼2015-04-21 07:42:23
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1106840621

金虫 (正式写手)

我的也是这种情况,不知道楼主怎样解决的?还有就是电转后是阳性菌落吗

发自小木虫Android客户端
4楼2016-05-23 10:53:35
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