| 查看: 1551 | 回复: 9 | ||
[求助]
求助！蛋白质切掉GST tag后沉了已有1人参与
|
| 我在BL21里表达GST-RASSF1A ，谷胱甘肽洗脱后，酶切切掉GST，蛋白就沉了（蛋白PI 9.25），是buffer不对吗？如何筛选合适的buffer？另外GST-RASSF1A挂在beads上，不用谷胱甘肽洗脱，直接加酶切掉GST，但只elute下少量RASSF1A，大部分还在beads上，如何防止蛋白切掉tag后沉在beads上？如果沉了，怎样洗下来？同样蛋白带His tag，也是相似问题，250mM咪唑只洗脱了一小半蛋白，大部分还在Ni beads上，EDTA也洗不下来（死在beads上的蛋白不做希望），如何避免蛋白沉在Ni beads上？ |
回复此楼» 猜你喜欢
三无产品还有机会吗
已经有4人回复
-
投稿返修后收到这样的回复，还有希望吗
已经有7人回复
-
压汞仪和BET测气凝胶孔隙率
已经有4人回复
-
博士申请都是内定的吗？
已经有14人回复
-
谈谈两天一夜的“延安行”
已经有13人回复
-
氨基封端PDMS和HDI反应快速固化
已经有11人回复
-
之前让一硕士生水了7个发明专利，现在这7个获批发明专利的维护费可从哪儿支出哈？
已经有11人回复
-
论文投稿求助
已经有4人回复
-
Applied Surface Science 这个期刊。有哪位虫友投过的能把word模板发给我参考一下嘛
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- PGEX-4T-1载体表达产物，GST标签的切除
已经有15人回复
2楼2015-04-19 14:16:53
3楼2015-04-19 16:48:11
4楼2015-04-19 20:36:53
5楼2015-04-20 12:16:44
6楼2015-04-20 17:55:02
7楼2015-04-20 19:45:35
8楼2015-04-20 20:11:50
9楼2015-04-22 18:46:57
10楼2017-04-18 15:01:04