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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 植物的蛋白在不同组织的功能问题？
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mofashishe

铜虫 (小有名气)

[求助] 植物的蛋白在不同组织的功能问题？

请问在叶绿体的蛋白有可能出现在植物根组织中的吗，在叶片中该蛋白是定位在叶绿体里面的，在根组织中定位在细胞质正常吗?

该蛋白是一个与光合作用过程中电子传递有关的蛋白，我通过WB证实了那个蛋白的确在根组织里面也存在，但是在投稿过程中reviewer一直对这个实验结果表示高度的怀疑，要我们进行详细讨论，请问大家有遇到过这种情况吗？


还有一个问题是，两组小样本（5<n<30）的显著性分析使用什么方法比较好？我原来使用student t-test的但是评委认为这种方法不适合小样本之间的比较。
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1楼 2015-04-12 11:37:01
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yudaoqian88

至尊木虫 (知名作家)

不良人
引用回帖:
7楼: Originally posted by sun_in_night at 2015-04-15 04:22:53
(1)WB 做个阴性对照，拿你的那个蛋白的knockout的mutant来做，如果在mutant根里还能检测到的话，那就有可能是非特异性的原因了。
（2）你做定位的时候用的启动子是什么，如果是35S或是ubiquitin的，那不奇怪在根中 ...

为什么使用这些启动子在根中就应该定位在细胞质？难道是因为根中不存在叶绿体？

发自小木虫Android客户端
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特别喜欢家门口开门的瞬间，宝宝那个高兴呀，蹦蹦跳跳，好不热闹！
8楼2016-02-01 02:41:49
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
WB验证，你的抗体特异性足够么?有可能是表达在根中和你研究蛋白类似的东西。
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2楼2015-04-12 20:58:52
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mofashishe

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2015-04-12 20:58:52
WB验证，你的抗体特异性足够么?有可能是表达在根中和你研究蛋白类似的东西。

WB单带，而且分子量也对，那样还有什么方法证明特异性呢？
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3楼2015-04-13 10:26:54
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
我的意思是否可能在根中有很近似的同原蛋白。可以用你已知蛋白保守区域的序列，去根中找找表达它或类似蛋白的基因。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
4楼2015-04-13 13:51:18
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