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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 生物菜鸟求助一些微生物基础问题
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容和buyer

新虫 (小有名气)

[求助] 生物菜鸟求助一些微生物基础问题 已有4人参与

1、平板梯度稀释法中所用的无菌水到底是什么水？书上一般都没有怎么说明，网上都说是蒸馏水？那去离子水可以吗？还是最好稀释用无菌生理盐水？
2、无菌生理盐水可以多次灭菌使用吗？会不会在灭菌的时候导致水分蒸发，渗透压改变，需不需要每次都重新配啊？
3、制作斜面时，斜面试管灭菌是塞着塞子灭菌吗？里面没有装任何东西，会不会导致加热压力里外不平衡，塞子弹出。
4、希望多交一些微生物好心师兄师姐，传授一点经验。微生物真的好多不太懂。谢谢啦。
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1楼 2015-04-03 21:04:07
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一个不小心就

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
容和buyer: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-04-03 22:03:56
1、不管你用蒸馏水、去离子水、超纯水哪怕是自来水来配制生理盐水，区别不大。稀释的时候一般用生理盐水，为了维持渗透压。你要不用生理盐水应该也没什么问题，不用太高估这个的影响。
2、多灭几次也没事的。你想啊，世界上那么多菌，各有不同，各自最适的渗透压也不同，岂不是每个菌都得配个最适浓度的生理盐水了。
3、硅胶塞是透气的，不是密封的
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2楼2015-04-03 21:30:40
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容和buyer

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 一个不小心就 at 2015-04-03 21:30:40
1、不管你用蒸馏水、去离子水、超纯水哪怕是自来水来配制生理盐水，区别不大。稀释的时候一般用生理盐水，为了维持渗透压。你要不用生理盐水应该也没什么问题，不用太高估这个的影响。
2、多灭几次也没事的。你想啊 ...

非常感谢。第二点，我配的是0.85%生理盐水，我只是怕重复灭菌对生理盐水浓度产生影响。谢谢啦。
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3楼2015-04-03 22:03:37
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microbhbu

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
二楼说得好！补充一下，斜面试管里不是什么都没有哦！是先在试管里装上培养基，塞好塞子灭菌，塞子是透气的硅胶塞或者棉塞。灭菌后，将试管摆成适宜倾斜度，凉后即成斜面。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2015-04-05 10:51:32
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巡游四方

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
稍微再帮你补充一些内容，你可以考虑一下，
1.菌落稀释用无菌水或者生理盐水都是可以的，但是如果是那种营养条件比较高的菌，建议在稀释的蒸馏水内添加一定比例的糖类做保护；
2.无菌生理盐水如果是密封包装的，可以用注射器吸出来直接使用，不用再灭菌了，但是吸取口那里需要酒精灭菌，防止污染；
3.一般做斜面是要先加入培养基，后灭菌的，无论是木塞还是橡胶塞都不是完全密封，所以不会把塞子弹出，但如果是密闭管，建议不要把盖子盖紧，因为密闭管会爆裂。
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5楼2015-04-06 13:13:24
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落花摇情

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 巡游四方 at 2015-04-06 13:13:24
稍微再帮你补充一些内容，你可以考虑一下，
1.菌落稀释用无菌水或者生理盐水都是可以的，但是如果是那种营养条件比较高的菌，建议在稀释的蒸馏水内添加一定比例的糖类做保护；
2.无菌生理盐水如果是密封包装的，可 ...

制作斜面一定要先装培养基再灭菌吗？额，我一直都是灭完再倒斜面，应该影响不大吧

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君子博学而日参省乎己，则知明而行无过矣
6楼2015-04-06 15:46:59
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流水狂战

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第一，无菌水的水源是蒸馏水好些，去离子水和生理盐水都可以用。第二，无菌生理盐水最好只灭菌一次，使用一次后就不用了。多次灭菌完成未知因素增多，不利于实验。第三，试管斜面的制备，一般融化培养基后加到试管中，事先量好体积，带塞灭菌，压力为零后，趁热拿出，摆斜面。一般做实验，先求逻辑和精致，再到拿捏分寸。慢慢来，半年就炼就扎实的基本功了。

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湖波荡漾，白云远来而近至。冲破巅峰，大道悠远而无尽。
7楼2015-04-06 16:27:58
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巡游四方

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 落花摇情 at 2015-04-06 15:46:59
制作斜面一定要先装培养基再灭菌吗？额，我一直都是灭完再倒斜面，应该影响不大吧
...

如果先灭再倒，容易被管壁或者其它物体和环境污染，所以最好是先融化，分装完再灭菌，再斜置
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8楼2015-04-09 10:05:30
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一个不小心就

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 落花摇情 at 2015-04-06 15:46:59
制作斜面一定要先装培养基再灭菌吗？额，我一直都是灭完再倒斜面，应该影响不大吧
...

先灭菌再分装也每什么问题，这样冷凝水似乎还能少点。但是感觉比先分装再灭菌繁琐一点。
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9楼2015-04-09 10:29:59
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