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容和buyer

新虫 (小有名气)

[求助] 生物菜鸟求助一些微生物基础问题已有4人参与

1、平板梯度稀释法中所用的无菌水到底是什么水?书上一般都没有怎么说明,网上都说是蒸馏水?那去离子水可以吗?还是最好稀释用无菌生理盐水?
2、无菌生理盐水可以多次灭菌使用吗?会不会在灭菌的时候导致水分蒸发,渗透压改变,需不需要每次都重新配啊?
3、制作斜面时,斜面试管灭菌是塞着塞子灭菌吗?里面没有装任何东西,会不会导致加热压力里外不平衡,塞子弹出。
4、希望多交一些微生物好心师兄师姐,传授一点经验。微生物真的好多不太懂。谢谢啦。
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一个不小心就

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
容和buyer: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-04-03 22:03:56
1、不管你用蒸馏水、去离子水、超纯水哪怕是自来水来配制生理盐水,区别不大。稀释的时候一般用生理盐水,为了维持渗透压。你要不用生理盐水应该也没什么问题,不用太高估这个的影响。
2、多灭几次也没事的。你想啊,世界上那么多菌,各有不同,各自最适的渗透压也不同,岂不是每个菌都得配个最适浓度的生理盐水了。
3、硅胶塞是透气的,不是密封的
2楼2015-04-03 21:30:40
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容和buyer

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 一个不小心就 at 2015-04-03 21:30:40
1、不管你用蒸馏水、去离子水、超纯水哪怕是自来水来配制生理盐水,区别不大。稀释的时候一般用生理盐水,为了维持渗透压。你要不用生理盐水应该也没什么问题,不用太高估这个的影响。
2、多灭几次也没事的。你想啊 ...

非常感谢。第二点,我配的是0.85%生理盐水,我只是怕重复灭菌对生理盐水浓度产生影响。谢谢啦。
3楼2015-04-03 22:03:37
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microbhbu

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
二楼说得好!补充一下,斜面试管里不是什么都没有哦!是先在试管里装上培养基,塞好塞子灭菌,塞子是透气的硅胶塞或者棉塞。灭菌后,将试管摆成适宜倾斜度,凉后即成斜面。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2015-04-05 10:51:32
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巡游四方

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
稍微再帮你补充一些内容,你可以考虑一下,
1.菌落稀释用无菌水或者生理盐水都是可以的,但是如果是那种营养条件比较高的菌,建议在稀释的蒸馏水内添加一定比例的糖类做保护;
2.无菌生理盐水如果是密封包装的,可以用注射器吸出来直接使用,不用再灭菌了,但是吸取口那里需要酒精灭菌,防止污染;
3.一般做斜面是要先加入培养基,后灭菌的,无论是木塞还是橡胶塞都不是完全密封,所以不会把塞子弹出,但如果是密闭管,建议不要把盖子盖紧,因为密闭管会爆裂。
5楼2015-04-06 13:13:24
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落花摇情

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 巡游四方 at 2015-04-06 13:13:24
稍微再帮你补充一些内容,你可以考虑一下,
1.菌落稀释用无菌水或者生理盐水都是可以的,但是如果是那种营养条件比较高的菌,建议在稀释的蒸馏水内添加一定比例的糖类做保护;
2.无菌生理盐水如果是密封包装的,可 ...

制作斜面一定要先装培养基再灭菌吗?额,我一直都是灭完再倒斜面,应该影响不大吧

[ 发自小木虫客户端 ]
君子博学而日参省乎己,则知明而行无过矣
6楼2015-04-06 15:46:59
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流水狂战

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
第一,无菌水的水源是蒸馏水好些,去离子水和生理盐水都可以用。第二,无菌生理盐水最好只灭菌一次,使用一次后就不用了。多次灭菌完成未知因素增多,不利于实验。第三,试管斜面的制备,一般融化培养基后加到试管中,事先量好体积,带塞灭菌,压力为零后,趁热拿出,摆斜面。一般做实验,先求逻辑和精致,再到拿捏分寸。慢慢来,半年就炼就扎实的基本功了。

[ 发自小木虫客户端 ]
湖波荡漾,白云远来而近至。冲破巅峰,大道悠远而无尽。
7楼2015-04-06 16:27:58
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巡游四方

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 落花摇情 at 2015-04-06 15:46:59
制作斜面一定要先装培养基再灭菌吗?额,我一直都是灭完再倒斜面,应该影响不大吧
...

如果先灭再倒,容易被管壁或者其它物体和环境污染,所以最好是先融化,分装完再灭菌,再斜置
8楼2015-04-09 10:05:30
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一个不小心就

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 落花摇情 at 2015-04-06 15:46:59
制作斜面一定要先装培养基再灭菌吗?额,我一直都是灭完再倒斜面,应该影响不大吧
...

先灭菌再分装也每什么问题,这样冷凝水似乎还能少点。但是感觉比先分装再灭菌繁琐一点。
9楼2015-04-09 10:29:59
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