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send!

铜虫 (小有名气)

[交流] 有谁用过BL21吗?为什么产酶这么不稳定啊??? 已有8人参与

有谁用过BL21吗?为什么产酶这么不稳定啊???
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hanjun80

金虫 (正式写手)


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1. 你的酶本身不稳定;
2. 你的发酵工艺或者后处理工艺不好;
3. 储存方式不对;
你需要搞清楚到底是什么问题
我笃信:人定胜天!
2楼2015-03-29 08:00:03
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gaoxueyan188

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我感觉应该是你表达酶蛋白的条件不是最佳条件,你可以设计实验寻找最佳的IPTG浓度,诱导温度及时间,另外如何LB培养基表达效果不好的话可以试试2YT培养基
3楼2015-03-29 12:53:28
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halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥?


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我实验室就用啊,感觉可以啊,诱导之后跑蛋白电泳也可以,可能是你的酶活性不高,或者产酶之后被分解了

[ 发自小木虫客户端 ]
现在我们能做的就是努力努力再努力
4楼2015-03-29 22:46:48
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send!

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hanjun80 at 2015-03-29 08:00:03
1. 你的酶本身不稳定;
2. 你的发酵工艺或者后处理工艺不好;
3. 储存方式不对;
你需要搞清楚到底是什么问题

我觉得BL21这个菌不稳定。
5楼2015-03-30 09:53:08
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send!

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by halfbeer at 2015-03-29 22:46:48
我实验室就用啊,感觉可以啊,诱导之后跑蛋白电泳也可以,可能是你的酶活性不高,或者产酶之后被分解了

我是用来做催化的,每次的催化都不一样,听说这个菌很不稳定。
6楼2015-03-30 09:55:17
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gene001

金虫 (正式写手)

就是个普通教师


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引用回帖:
6楼: Originally posted by send! at 2015-03-30 09:55:17
我是用来做催化的,每次的催化都不一样,听说这个菌很不稳定。...

不会呀,BL21和pET系列载体配合是很成熟的一套细菌表达系统。主要是看你发酵和诱导条件的控制是不是理想!
大家共同交流、共同提高!!!
7楼2015-03-30 14:12:43
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183王山山

木虫 (著名写手)

区长

赞一下

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
一切都会好
8楼2015-03-30 14:32:29
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send!

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by gene001 at 2015-03-30 14:12:43
不会呀,BL21和pET系列载体配合是很成熟的一套细菌表达系统。主要是看你发酵和诱导条件的控制是不是理想!...

会啊,用过的都说不稳定。
9楼2015-03-30 14:41:54
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aesar9983

新虫 (初入文坛)


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这不是个很成熟的菌么
一直用的很稳定很好啊
10楼2015-03-30 16:07:46
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