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急！做线粒体的三段基因，跑出来的电泳为什么是这个样子的！Marker怎么都看不清？ 已有2人参与
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DNA提取用的是Qiagen的试剂盒 pcr体系是25ul的 12ul Taq 酶 1ul 模板 2ul 引物各1ul 10ul ddH2O PCR反应条件 （1）扩增D-loop基因的反应条件 94 ℃预变性3min；94℃变性45s，退火温度退火30 s，72 ℃延伸90 s，循环35 次；最后72℃延伸5 min。 （2）扩增cyt b基因的反应条件 94 ℃预变性80 s；94℃变性42 s，47℃退火30 s，72 ℃延伸80 s，循环30 次；最后72℃延伸5 min。 （3）扩增Cox1基因的反应条件 94 ℃预变性80 s；94℃变性42 s，55℃退火30 s，72 ℃延伸80 s，循环30 次；最后72℃延伸5 min。 电泳用的1.5%琼胶，120V电压 35min，TBE缓冲液  20150325wwzD.JPG |
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4楼2015-06-24 17:24:08
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样品比marker的颜色还要亮了……marker不亮1.可能是marker的问题，是不是保存温度不对，然后质量下降，或者过期之类的，借别人的marker对比一下。2.胶的问题3.缓冲液……（个人觉得marker问题的比例大一点） 发自小木虫Android客户端 |
5楼2018-12-07 20:17:26
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