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dan-deng

银虫 (初入文坛)

[求助] 大神帮我看看我这WB是怎么了? 已有3人参与

做出来没条带,很丑但ACTIN正常,求帮忙分析。
一抗是博尔森的  稀释3000倍  二抗稀释10000倍  以前做起来都没问题的 这次为什么突然变成这种了?
第二张图是Actin

大神帮我看看我这WB是怎么了?
2015.03.25_11.13.13_Ch+Marker.jpg


大神帮我看看我这WB是怎么了?-1
2015.03.25_16.30.34_Ch+Marker.jpg
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kokimushi

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
因为对照很好 所有如果不是抗体的问题,可能有以下几点原因:
1 加样品加太多;
2 加样的时候孔没有疏通以下 导致加冒
3 没有洗好
To do wot really like.
4楼2015-03-25 22:29:40
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junior850621

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
遇过类似的情况,当时我们换了一种国产的保鲜膜。后来分析里面可能有重金属离子,导致发光液底物淬灭,会发出这样的光。不知能不能帮上你,如果你其他部分都没有问题的话。
2楼2015-03-25 19:39:07
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dan-deng

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by junior850621 at 2015-03-25 19:39:07
遇过类似的情况,当时我们换了一种国产的保鲜膜。后来分析里面可能有重金属离子,导致发光液底物淬灭,会发出这样的光。不知能不能帮上你,如果你其他部分都没有问题的话。

应该不是    我上次也是用的这种保鲜膜也做出来过   不知道是不是胶的问题   你觉得又没可能?
3楼2015-03-25 20:16:03
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junior850621

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by dan-deng at 2015-03-25 20:16:03
应该不是    我上次也是用的这种保鲜膜也做出来过   不知道是不是胶的问题   你觉得又没可能?...

可是你对照没这么严重的问题呀,我的一个怀疑是,有没有可能你出问题的那张保鲜膜上洒过什么东西……配胶我一般把APS减半,让胶凝得慢一些,会比较均一,可能会避开一些不知道的问题。
5楼2015-03-26 13:16:05
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