24小时热门版块排行榜    

查看: 1996  |  回复: 8

wyanyun

铁虫 (初入文坛)

[求助] PVDF膜被过度封闭后如何处理 已有4人参与

各位,本人目前在做一实验,在PVDF膜上包被多个抗体,用以检测样本中的抗原,但是显色后发现,样本浓度低的样本有清楚显色,而样本浓度高的样本反而没有显色,有老师认为是因为高蛋白浓度的样本将膜封闭了,导致抗原无法和膜上抗体结合。由于包被好的膜非常珍贵,所以想请教各位是否有办法处理,让我可以重新调整样本浓度后再次检测,谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陌路行客

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

如果真是蛋白浓度过高的话,那就试着多洗几遍膜看看,
人生中的悲剧太多了
2楼2014-10-03 15:21:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

巨可爱的小猪

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

样本怎么能把膜封闭了呢,就算膜上样本过多,样本也会于抗体特异性结合,使膜曝光更强啊。
3楼2014-10-03 21:13:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

langzian

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

不会的,下次再做时,把不同的蛋白剪开分别抗就好

[ 发自小木虫客户端 ]
江山
4楼2014-10-04 13:30:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

样品浓度高的不显色,这应该不是封闭的问题。我倒觉得是检测方法本身的局限,很多方法都只能测低浓度而不能测高浓度,你不妨说说你的方法的检测原理。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2014-10-04 18:53:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wyanyun

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by liuderong at 2014-10-04 18:53:09
样品浓度高的不显色,这应该不是封闭的问题。我倒觉得是检测方法本身的局限,很多方法都只能测低浓度而不能测高浓度,你不妨说说你的方法的检测原理。

就是在膜上标记多个抗体,然后用生物素标记样本中的蛋白,之后将标记好的样本与膜反应。我也觉得不是封闭的问题,我的对照组样本都出来了,疾病组比对照组样本浓度高了10倍而已。
6楼2014-10-08 15:04:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wyanyun

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 巨可爱的小猪 at 2014-10-03 21:13:19
样本怎么能把膜封闭了呢,就算膜上样本过多,样本也会于抗体特异性结合,使膜曝光更强啊。

我也这么觉得,但是确实找不到其他解释了
7楼2014-10-08 15:05:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Budaogao

新虫 (小有名气)

封闭久了背景会深,但是浓度高的话反而更好曝光,浓度低应该背景更深才对啊,换一种显色剂试试呢,用用别人的

发自小木虫IOS客户端
8楼2019-01-19 20:28:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Budaogao

新虫 (小有名气)

但是不应该让蛋白被封闭啊,如果会这样的话,如何在特异性结合一抗呢,应该不是这个原因吧

发自小木虫IOS客户端
9楼2019-01-19 20:28:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wyanyun 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +3 困于星晨 2026-03-17 3/150 2026-03-17 14:08 by ms629
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +3 慕寒mio 2026-03-16 3/150 2026-03-17 13:46 by houyaoxu
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
[考研] 268求调剂 +5 好运连绵不绝 2026-03-12 5/250 2026-03-17 10:12 by Sammy2
[考研] 304求调剂 +7 小熊joy 2026-03-14 7/350 2026-03-17 08:53 by 雾散后相遇lc
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
[考研] 东南大学364求调剂 +5 JasonYuiui 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:28 by 木瓜膏
[考研] 286求调剂 +3 lemonzzn 2026-03-16 5/250 2026-03-16 20:43 by lemonzzn
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 321求调剂 +5 大米饭! 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:58 by 漾漾123sun
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-16 3/150 2026-03-16 10:07 by 求调剂zz
[考研] 0856专硕279求调剂 +5 加油加油!? 2026-03-15 5/250 2026-03-15 11:58 by 2020015
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[考研] 复试调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 求调剂 资源与环境 285 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:31 by houyaoxu
[考研] 270求调剂 085600材料与化工专硕 +3 YXCT 2026-03-11 3/150 2026-03-13 10:13 by houyaoxu
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
[考研] 求调剂材料专硕293 +6 段_(:з」∠)_ 2026-03-10 6/300 2026-03-10 18:22 by ms629
信息提示
请填处理意见