24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 5790  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

weisuofeng

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS凝胶电泳,我的纯蛋白浓度大约22%左右,上样量我该上多大浓度和上多少样啊? 已有2人参与

SDS凝胶电泳,我的纯蛋白浓度大约22%左右,上样量我该上多大浓度和上多少样啊?
我想用BSA做个阳性对照,它的上样量浓度是多少和上多少微升啊?
求帮助啊,各位大神
回复此楼
好好学习
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

帖航

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by weisuofeng at 2015-03-19 12:22:49
你说的5μg我不是很懂啊,考染,10孔,我应该上样几微升,我一般10微升,你的意思是保证里面有5μg蛋白么?...

电泳一般是用来定性的,上多少量其实无所谓,主要是能看到你的蛋白。如果是对照的话,可以配成2mg/ml,然后和2*上样缓冲液混合,上样10μl,这样跑出来的条带大小正好为10μg,可用软件粗略的定量。
需要注意的是,你的上样缓冲液浓度,如果是5*的,对照配成1.25mg/ml。
你的蛋白样品22%,指的是22mg/100ml?这种浓度建议上样20μl,如果不做WB,建议用1.5mm板。还有蛋白浓度请用mg/ml为单位!!!
4楼2015-03-20 09:47:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你是打算用用什么染色?考然的灵敏度在μg,你上5μg应该可以很清楚。如果你用银染,0.5-1μg足够。上样的总蛋白浓度不要超过3μg,尤其是膜蛋白,否则变性时可能不会太充分。
2楼2015-03-19 11:27:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weisuofeng

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2015-03-19 11:27:16
你是打算用用什么染色?考然的灵敏度在μg,你上5μg应该可以很清楚。如果你用银染,0.5-1μg足够。上样的总蛋白浓度不要超过3μg,尤其是膜蛋白,否则变性时可能不会太充分。

你说的5μg我不是很懂啊,考染,10孔,我应该上样几微升,我一般10微升,你的意思是保证里面有5μg蛋白么?
好好学习
3楼2015-03-19 12:22:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0854求调剂 +23 门路摸摸 2026-04-15 27/1350 2026-04-19 01:59 by 烟雨流涯
[考研] 收到复试调剂但是去不了 +8 小蜗牛* 2026-04-16 8/400 2026-04-18 11:15 by zixin2025
[考研] 化工学硕294分,求导师收留 +33 yzyzx 2026-04-12 37/1850 2026-04-17 23:00 by wunaiy88
[考研] 一志愿华中农业071010,320求调剂 +17 困困困困坤坤 2026-04-14 19/950 2026-04-17 20:08 by 关一盏灯cd
[考研] 304求调剂 +7 castLight 2026-04-16 7/350 2026-04-17 20:05 by 关一盏灯cd
[考研] 一志愿中科大材料与化工,353分还有调剂学校吗 +10 否极泰来2026 2026-04-15 12/600 2026-04-17 17:54 by mapenggao
[考研] 294求调剂 +7 淡然654321 2026-04-17 8/400 2026-04-17 16:36 by wutongshun
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀,最好在一个月之内的,研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 5/250 2026-04-17 10:02 by bobvan
[考研] 297,工科调剂?河南农业大学本科 +14 河南农业大学-能 2026-04-14 14/700 2026-04-16 14:41 by dingyanbo1
[考研] 327求调剂 +26 Xxjc1107. 2026-04-13 29/1450 2026-04-16 10:52 by Espannnnnol
[考研] 求调剂学校 +14 不会吃肉 2026-04-13 16/800 2026-04-15 21:59 by noqvsozv
[考研] 一志愿A区211,22408 321求调剂 +6 随心所欲☆ 2026-04-15 7/350 2026-04-15 21:45 by lbsjt
[考研] 0854调剂 +13 长弓傲 2026-04-12 16/800 2026-04-15 13:45 by fenglj492
[教师之家] 转长聘了 +7 简单化xn 2026-04-13 7/350 2026-04-14 14:50 by xindong
[考研] 245求调剂 +6 冰糖橘?汽水 2026-04-13 10/500 2026-04-14 10:49 by jyl0317
[考研] 一志愿中南大学 0855 机械 286 求调剂 +11 不会吃肉 2026-04-12 11/550 2026-04-13 21:59 by bljnqdcc
[考研] B区0809 ,数一英一,290 求调剂 +3 泠潍1111 2026-04-12 4/200 2026-04-13 20:35 by 学员JpLReM
[考研] 302求调剂 +10 易!? 2026-04-13 10/500 2026-04-13 19:04 by lbsjt
[考研] 一志愿085802 323分求调剂 +13 drizzle_9 2026-04-12 14/700 2026-04-13 10:26 by Faiz5552
[考研] 调剂结束 +6 floriea 2026-04-12 8/400 2026-04-12 18:13 by zhouxiaoyu
信息提示
请填处理意见