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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 化学合成的DNA在PAGE上有两个条带是什么原因
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jackmill

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1楼 2015-03-12 20:59:03
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更深的蓝

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先你这是native-PAGE还是non-native PAGE，如果是native-PAGE，那么有可能一条是自由的ssDNA,另外一条是发卡结构
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2楼2015-03-13 10:13:13
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jackmill

禁虫 (小有名气)
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3楼2015-03-13 10:15:28
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更深的蓝

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by jackmill at 2015-03-13 10:15:28
忘记说了，我这个是非变性的...

是否经历退火过程？通过退火能最大限度形成发卡结构。 1应该是46nt, 2是56nt.
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4楼2015-03-13 10:26:38
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jackmill

禁虫 (小有名气)
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5楼2015-03-13 11:15:01
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更深的蓝

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by jackmill at 2015-03-13 11:15:01
经历过了，先95度10min，然后缓慢降到室温，大约1个半小时，溶液中有140mM镁离子...

Mg浓度太高了吧，一般10mM就够了，太高会导致T-G错配
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低调务实！
6楼2015-03-13 18:07:06
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jackmill

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7楼2015-03-13 18:38:41
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jackmill

禁虫 (小有名气)
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8楼2015-03-13 18:45:27
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