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blowriver

铜虫 (初入文坛)

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专业: 生物大分子结构与功能

[求助] 求助液氮研磨的相关问题已有1人参与

初涉这方面的实验，菜鸟一只请各位不吝赐教哈~

1.我提的是植物DNA ，之前见别人做的时候研钵都要用锡纸包着放进高压锅灭菌，但听一些同学说直接倒乙醇烧上几分钟也可以，哪种好些？
2.研钵预冷的时候我是直接加液氮进去的，过一会再放材料进去研磨，不知冷却的够不够（其实更想知道在提DNA的时候预冷有没有必要）
3.最头疼的是研磨完毕之后很多细粉会贴在研钵的壁上，用药匙也很难刮下来，这种情况一般是怎么处理的呢？
4.一组有好几批的材料，要是每个材料一个研钵的话堆成小山了···但是不换研钵又害怕污染，一般大家是怎么做的呢？或者怎么清理的呢？
5一般在提的时候一个样品提几份呢？要不要做多两个重复？
6 有人在研磨的过程中加入石英砂，研磨完后如何去掉呢？
先谢过各位啦~

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1楼 2015-03-11 17:13:17

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gnot_nail

金虫 (正式写手)

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专业: 生物化学

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
blowriver(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-03-11 20:29:58

1.个人觉得，时间充裕你就提前灭菌锅灭一下，要是赶实验就酒精烧。。灭一下效果会好一点。
2.冷却够不够看你液氮在研钵里的挥发的速度，一般就是等倒进去液氮挥发变慢了，冷却就差不多了（大概预冷2-3次左右）；预冷有必要，因为假如你的材料是在液氮中保存拿出来研磨，如果研钵温度高，两者有温差，那你的材料直接磨可能就会化冻，对提取有影响我感觉。
3.如果你材料够多的话，那一点点不要也罢，因为久了有可能你会把空气中水蒸气冻结的冰晶一起混入样品中。如果一定要的话，那我也不知道怎么弄，因为一般材料都会准备充足，或者你可以试着再倒入液氮，一般壁上残余的就会沉到研钵中心。
4.材料多的话我都是准备对应数目的研钵，如果非得用同一个的话，那就把研钵蒸馏水清洗干净，然后倒一点酒精烧吧，这样快一点，但是我没试过，不知道效果如何。
5.指的是提DNA吗？建议多提一两份。以防只提一个提的不好浓度过低。
6.不了解。

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