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西西月月

新虫 (小有名气)

[求助] 急急急!样品过SPE柱后,淋洗,洗脱的回收率怎么算? 已有2人参与

各位友友好!先祝大家新年快乐!
我现在在做SPE优化条件,问下大家样品液过柱,淋洗,洗脱,每一步的回收率recovery和损失率loss rate 具体是怎么计算的?文献上只有结果没有具体的公式和计算步骤,谢谢大家了!我很着急!
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西西月月

新虫 (小有名气)

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引用回帖:
4楼: Originally posted by superyeast at 2015-02-18 22:32:47
淋洗,洗脱体积和上样体积一般来说是不一样的。SPE操作一般是用移液管或量桶做,你实际加了多少体积是知道的。用实际体积乘上测出的浓度得到液体中化合物的量。然后根据每一步的目的(上样和淋洗希望化合物挂在柱子 ...

你好,刚接触SPE柱,有些问题还是不明白,假如我上样是10ug,上样后留在柱子上的是9ug,淋洗下来是1ug,洗脱下来是7ug,请问这种情况下各个步骤的回收率怎么计算呢?谢谢了
6楼2015-02-20 16:03:44
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西西月月: 金币+5, ★★★很有帮助, 非常感谢! 2015-02-20 11:24:44
每做一步做个HPLC,然后根据测出的浓度和当时的样品总体积算你收回了多少。

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-02-17 22:24:41
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西西月月

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by superyeast at 2015-02-17 22:24:41
每做一步做个HPLC,然后根据测出的浓度和当时的样品总体积算你收回了多少。

你好,我想问一下,
(1)样品过柱后的体积和上样的体积是不是可以认为就是一样的?此时的回收率等于(初始浓度-上样后浓度)/初始浓度,是这样吗?
(2)淋洗这一步要怎么计算呢?是要测出淋洗之后的体积和浓度后,两者的乘积除以柱子上吸附的量吗? 那这个体积和所取得淋洗液的体积是不是一样的?
(3)洗脱这一步的回收率是和淋洗的是一样的道理吗?
不知道我理解的对不对,谢谢了!
3楼2015-02-18 16:28:16
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 西西月月 at 2015-02-17 20:28:16
你好,我想问一下,
(1)样品过柱后的体积和上样的体积是不是可以认为就是一样的?此时的回收率等于(初始浓度-上样后浓度)/初始浓度,是这样吗?
(2)淋洗这一步要怎么计算呢?是要测出淋洗之后的体积和浓度 ...

淋洗,洗脱体积和上样体积一般来说是不一样的。SPE操作一般是用移液管或量桶做,你实际加了多少体积是知道的。用实际体积乘上测出的浓度得到液体中化合物的量。然后根据每一步的目的(上样和淋洗希望化合物挂在柱子上,洗脱希望化合物在流出液中)算产率。

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4楼2015-02-18 22:32:47
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