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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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西西月月

新虫 (小有名气)

[求助] 急急急!样品过SPE柱后,淋洗,洗脱的回收率怎么算? 已有2人参与

各位友友好!先祝大家新年快乐!
我现在在做SPE优化条件,问下大家样品液过柱,淋洗,洗脱,每一步的回收率recovery和损失率loss rate 具体是怎么计算的?文献上只有结果没有具体的公式和计算步骤,谢谢大家了!我很着急!
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superyeast

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【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 西西月月 at 2015-02-17 20:28:16
你好,我想问一下,
(1)样品过柱后的体积和上样的体积是不是可以认为就是一样的?此时的回收率等于(初始浓度-上样后浓度)/初始浓度,是这样吗?
(2)淋洗这一步要怎么计算呢?是要测出淋洗之后的体积和浓度 ...

淋洗,洗脱体积和上样体积一般来说是不一样的。SPE操作一般是用移液管或量桶做,你实际加了多少体积是知道的。用实际体积乘上测出的浓度得到液体中化合物的量。然后根据每一步的目的(上样和淋洗希望化合物挂在柱子上,洗脱希望化合物在流出液中)算产率。

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4楼2015-02-18 22:32:47
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yongxa

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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西西月月: 金币+5, ★★★很有帮助, 非常感谢! 2015-02-20 16:04:04
你可以用质量计算,比如上样1L,样品浓度为100ug/L,那么质量就是100ug,浓缩至1mL,富集倍数就是1000.如果你在浓缩后的1mL中测得了90ug,那么回收率就是90%。
5楼2015-02-20 10:46:08
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yongxa

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 西西月月 at 2015-02-20 16:05:13
你好,刚接触SPE柱,有些问题还是不明白,假如我上样是10ug,上样后留在柱子上的是9ug,淋洗下来是1ug,洗脱下来是7ug,请问这种情况下各个步骤的回收率怎么计算呢?谢谢了...

固相萃取本身就是个分离富集过程。
淋洗过程是除杂,洗脱是将吸附富集在固相萃取柱填料上的待测物转移到洗脱液中。通常洗脱液需要氮吹浓缩。
淋洗过程我们要考察淋洗液的洗脱能力,防止淋洗造成待测物损失。这可通过调节淋洗液的洗脱能力,一般就是调节有机相和水相的比例。
洗脱液就要力求将待测物完全洗脱下来,可以通过调节有机相和水相的比例,调节有机试剂的种类来实现。
你举的例子回收率是7ug/10ug*100%=70%。

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8楼2015-02-20 19:55:23
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superyeast

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8楼: Originally posted by yongxa at 2015-02-19 23:55:23
固相萃取本身就是个分离富集过程。
淋洗过程是除杂,洗脱是将吸附富集在固相萃取柱填料上的待测物转移到洗脱液中。通常洗脱液需要氮吹浓缩。
淋洗过程我们要考察淋洗液的洗脱能力,防止淋洗造成待测物损失。这可 ...

我觉得应该这么算

上样收率 9/10*100%=90%
淋洗收率 8/9*100%=89%
洗脱收率 7/8*100%=88%
总收率 7/10*100%=70%

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9楼2015-02-20 22:36:15
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superyeast

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西西月月: 金币+5, ★★★很有帮助, 非常感谢! 2015-02-20 11:24:44
每做一步做个HPLC,然后根据测出的浓度和当时的样品总体积算你收回了多少。

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2楼2015-02-17 22:24:41
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西西月月

新虫 (小有名气)

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2楼: Originally posted by superyeast at 2015-02-17 22:24:41
每做一步做个HPLC,然后根据测出的浓度和当时的样品总体积算你收回了多少。

你好,我想问一下,
(1)样品过柱后的体积和上样的体积是不是可以认为就是一样的?此时的回收率等于(初始浓度-上样后浓度)/初始浓度,是这样吗?
(2)淋洗这一步要怎么计算呢?是要测出淋洗之后的体积和浓度后,两者的乘积除以柱子上吸附的量吗? 那这个体积和所取得淋洗液的体积是不是一样的?
(3)洗脱这一步的回收率是和淋洗的是一样的道理吗?
不知道我理解的对不对,谢谢了!
3楼2015-02-18 16:28:16
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西西月月

新虫 (小有名气)

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4楼: Originally posted by superyeast at 2015-02-18 22:32:47
淋洗,洗脱体积和上样体积一般来说是不一样的。SPE操作一般是用移液管或量桶做,你实际加了多少体积是知道的。用实际体积乘上测出的浓度得到液体中化合物的量。然后根据每一步的目的(上样和淋洗希望化合物挂在柱子 ...

你好,刚接触SPE柱,有些问题还是不明白,假如我上样是10ug,上样后留在柱子上的是9ug,淋洗下来是1ug,洗脱下来是7ug,请问这种情况下各个步骤的回收率怎么计算呢?谢谢了
6楼2015-02-20 16:03:44
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西西月月

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by yongxa at 2015-02-20 10:46:08
你可以用质量计算,比如上样1L,样品浓度为100ug/L,那么质量就是100ug,浓缩至1mL,富集倍数就是1000.如果你在浓缩后的1mL中测得了90ug,那么回收率就是90%。

你好,刚接触SPE柱,有些问题还是不明白,假如我上样是10ug,上样后留在柱子上的是9ug,淋洗下来是1ug,洗脱下来是7ug,请问这种情况下各个步骤的回收率怎么计算呢?谢谢了
7楼2015-02-20 16:05:13
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西西月月

新虫 (小有名气)

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8楼: Originally posted by yongxa at 2015-02-20 19:55:23
固相萃取本身就是个分离富集过程。
淋洗过程是除杂,洗脱是将吸附富集在固相萃取柱填料上的待测物转移到洗脱液中。通常洗脱液需要氮吹浓缩。
淋洗过程我们要考察淋洗液的洗脱能力,防止淋洗造成待测物损失。这可 ...

嗯,非常感谢!
10楼2015-02-21 10:08:00
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