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西西月月

新虫 (小有名气)

[求助] 急急急！样品过SPE柱后，淋洗，洗脱的回收率怎么算？ 已有2人参与

各位友友好！先祝大家新年快乐！
我现在在做SPE优化条件，问下大家样品液过柱，淋洗，洗脱，每一步的回收率recovery和损失率loss rate 具体是怎么计算的？文献上只有结果没有具体的公式和计算步骤，谢谢大家了！我很着急！
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1楼 2015-02-17 19:17:30
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 西西月月 at 2015-02-17 20:28:16
你好，我想问一下，
（1）样品过柱后的体积和上样的体积是不是可以认为就是一样的？此时的回收率等于（初始浓度-上样后浓度）/初始浓度，是这样吗？
（2）淋洗这一步要怎么计算呢？是要测出淋洗之后的体积和浓度 ...

淋洗，洗脱体积和上样体积一般来说是不一样的。SPE操作一般是用移液管或量桶做，你实际加了多少体积是知道的。用实际体积乘上测出的浓度得到液体中化合物的量。然后根据每一步的目的（上样和淋洗希望化合物挂在柱子上，洗脱希望化合物在流出液中）算产率。

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西西月月
4楼2015-02-18 22:32:47
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yongxa

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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西西月月: 金币+5, ★★★很有帮助, 非常感谢！ 2015-02-20 16:04:04
你可以用质量计算，比如上样1L，样品浓度为100ug/L，那么质量就是100ug,浓缩至1mL,富集倍数就是1000.如果你在浓缩后的1mL中测得了90ug,那么回收率就是90%。
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5楼2015-02-20 10:46:08
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yongxa

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 西西月月 at 2015-02-20 16:05:13
你好，刚接触SPE柱，有些问题还是不明白，假如我上样是10ug,上样后留在柱子上的是9ug,淋洗下来是1ug,洗脱下来是7ug,请问这种情况下各个步骤的回收率怎么计算呢？谢谢了...

固相萃取本身就是个分离富集过程。
淋洗过程是除杂，洗脱是将吸附富集在固相萃取柱填料上的待测物转移到洗脱液中。通常洗脱液需要氮吹浓缩。
淋洗过程我们要考察淋洗液的洗脱能力，防止淋洗造成待测物损失。这可通过调节淋洗液的洗脱能力，一般就是调节有机相和水相的比例。
洗脱液就要力求将待测物完全洗脱下来，可以通过调节有机相和水相的比例，调节有机试剂的种类来实现。
你举的例子回收率是7ug/10ug*100%=70%。
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西西月月
8楼2015-02-20 19:55:23
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superyeast

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
8楼: Originally posted by yongxa at 2015-02-19 23:55:23
固相萃取本身就是个分离富集过程。
淋洗过程是除杂，洗脱是将吸附富集在固相萃取柱填料上的待测物转移到洗脱液中。通常洗脱液需要氮吹浓缩。
淋洗过程我们要考察淋洗液的洗脱能力，防止淋洗造成待测物损失。这可 ...

我觉得应该这么算

上样收率 9/10*100%=90%
淋洗收率 8/9*100%=89%
洗脱收率 7/8*100%=88%
总收率 7/10*100%=70%

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西西月月
9楼2015-02-20 22:36:15
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西西月月: 金币+5, ★★★很有帮助, 非常感谢！ 2015-02-20 11:24:44
每做一步做个HPLC，然后根据测出的浓度和当时的样品总体积算你收回了多少。

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2楼2015-02-17 22:24:41
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西西月月

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by superyeast at 2015-02-17 22:24:41
每做一步做个HPLC，然后根据测出的浓度和当时的样品总体积算你收回了多少。

你好，我想问一下，
（1）样品过柱后的体积和上样的体积是不是可以认为就是一样的？此时的回收率等于（初始浓度-上样后浓度）/初始浓度，是这样吗？
（2）淋洗这一步要怎么计算呢？是要测出淋洗之后的体积和浓度后，两者的乘积除以柱子上吸附的量吗？ 那这个体积和所取得淋洗液的体积是不是一样的？
（3）洗脱这一步的回收率是和淋洗的是一样的道理吗？
不知道我理解的对不对，谢谢了！
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3楼2015-02-18 16:28:16
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西西月月

新虫 (小有名气)
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4楼: Originally posted by superyeast at 2015-02-18 22:32:47
淋洗，洗脱体积和上样体积一般来说是不一样的。SPE操作一般是用移液管或量桶做，你实际加了多少体积是知道的。用实际体积乘上测出的浓度得到液体中化合物的量。然后根据每一步的目的（上样和淋洗希望化合物挂在柱子 ...

你好，刚接触SPE柱，有些问题还是不明白，假如我上样是10ug,上样后留在柱子上的是9ug,淋洗下来是1ug,洗脱下来是7ug,请问这种情况下各个步骤的回收率怎么计算呢？谢谢了
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6楼2015-02-20 16:03:44
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西西月月

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by yongxa at 2015-02-20 10:46:08
你可以用质量计算，比如上样1L，样品浓度为100ug/L，那么质量就是100ug,浓缩至1mL,富集倍数就是1000.如果你在浓缩后的1mL中测得了90ug,那么回收率就是90%。

你好，刚接触SPE柱，有些问题还是不明白，假如我上样是10ug,上样后留在柱子上的是9ug,淋洗下来是1ug,洗脱下来是7ug,请问这种情况下各个步骤的回收率怎么计算呢？谢谢了
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7楼2015-02-20 16:05:13
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西西月月

新虫 (小有名气)
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8楼: Originally posted by yongxa at 2015-02-20 19:55:23
固相萃取本身就是个分离富集过程。
淋洗过程是除杂，洗脱是将吸附富集在固相萃取柱填料上的待测物转移到洗脱液中。通常洗脱液需要氮吹浓缩。
淋洗过程我们要考察淋洗液的洗脱能力，防止淋洗造成待测物损失。这可 ...

嗯，非常感谢！
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10楼2015-02-21 10:08:00
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