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【求助】请教SPE小柱的使用 已有8人参与
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最近用到SPE小柱，以前没有使用过。请教各位达人：应该如何上样？在整个操作过程中怎么感觉总会有空气进入到柱子中。这应该如何避免？还有就是SPE小柱再生过之后如何保存？是应该将柱子里面的液体全部排空还是浸没在甲醇里面？ |
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zhanghw8253
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xiaodu2007693(金币+1):感谢您提供，欢迎常来药学版交流~ 2010-04-23 17:40
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以下资料供参考，不知是否有用。 固相萃取(Solid Phase Extraction,简称SPE) 针对填料保留机理的不同(填料保留目标化合物或保留杂质)，操作稍有不同。 如果填料保留目标化合物，固相萃取操作一般有四步：  活化——除去柱子内的杂质并创造一定的溶剂环境。 上样——将样品用一定的溶剂溶解，转移入柱并使组分保留在柱上。 淋洗——最大程度除去干扰物。 洗脱——用小体积的溶剂将被测物质洗脱下来并收集。 如果填料保留杂质，固相萃取操作一般有三步： 活化——除去柱子内的杂质并创造一定的溶剂环境。 上样——将样品转移入柱，此时大部分目标化合物会随样品基液流出，杂质被保留在柱上。故此步骤要开始收集。 洗脱——用小体积的溶剂将组分淋洗下来并收集。合并收集液。此种情况多用于食品或农残分析中去除色素。 另有《固相萃取技术手册》，见附件http://d.namipan.com/d/0474c1b49 ... 3bf8daf7f6a03692300 [ Last edited by zhanghw8253 on 2010-4-23 at 14:50 ] |
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现在正在用的waters oasis HLB的SPE小柱，做的是多肽类的血浆样品前处理； 具体步骤是： 1、1ml甲醇活化； 2、1ml水平衡； 3、上样，我上的是血样，300ul的犬血浆，这一步一定要控制滴速，要保证你的检测成分充分的与固定相结合； 4、一定浓度的含甲醇水（我用的是60%的甲醇，要根据你的成分进行摸索，甲醇比例高了，可尽可能地除去杂质，但要保证你的药没有损失）； 5、纯甲醇（或者加入一定量的酸）洗脱。 就这样了。祝你好运。 |
9楼2010-05-02 19:14:02
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