| 查看: 762 | 回复: 1 | ||
[求助]
DGGE切胶回收后有部分P不出条带！急急急急求帮助！
|
好不容易把DGGE做出了一张漂亮些的图 就卡在回收上了。 DGGE前扩16s rDNA V3区用的是HDA1-GC，HDA2，序列如下： HDA1-GC 5'-CGC CCG GGG CGC GCC CCG GGC GGG GCG GGG GCA CGG GGG GAC TCC TAC GGG AGG CAG CAG T-3' HDA2 5'-GTA TTA CCG CGG CTG CTG GCA C-3' 切胶是师兄帮忙切的，他之前经验很丰富来着，表示没见过我这种大批扩不出来的情况。。 后面用的引物是HDA1和HDA2，序列如下： HDA1 5'-ACT CCT ACG GGA GGC AGC AG-3' HDA2 5'-GTA TTA CCG CGG CTG CTG GCA C-3' 切胶后用80微升的无菌水浸没，4°隔了24h以上进行的PCR，最怪的就是一共回收了48条带，其中上面24条里大多数能扩出来，但后面24条基本就没东西了。但是DGGE图上的条带都是很分明的，量也差不多的样子。PCR程序和之前用带GC夹子的引物进行扩增时的程序是一样的。 还有一点最怪的是！marker对应100bp以下那块区域上，引物二聚体那条带在所有PCR产物里特别明显！！ 为什么会出现这种情况呢？？ 因为我是新手，刚开始半个月，本来不该着急的，但现在卡成这样就差最后一步了，试剂公司测样公司都快放假了，欲哭无泪。。求大家解答！ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有152人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有6人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蛋白质电泳跑不出条带怎么办？？？？急急急！！！！
已经有4人回复
- 各位大神，求助：PCR产物纯化后没有条带了……
已经有34人回复
- PCR条带不清晰
已经有20人回复
- 做病毒检测，PCR跑胶500bp处总是有条带
已经有4人回复
- 电泳条带很淡，能用于割胶回收吗
已经有7人回复
- 胶回收后再次pcr无目的条带，急，望神人指点。。。
已经有16人回复
- 土壤总细菌16S PCR-条带不亮的问题
已经有19人回复
- overlap PCR做不出来呐。。。。
已经有23人回复
- 3‘RACE inner PCR 电泳结果总是有弥散现象回收条带不成带状什么原因啊？
已经有17人回复
- 天根公司的Long Taq DNA Polymerase的PCR扩增产物是平末端还是带A尾巴？
已经有8人回复
2楼2015-02-04 21:23:06
120