24小时热门版块排行榜    

查看: 2916  |  回复: 5

windygo

木虫 (正式写手)

咸蛋超人

[求助] 关于果胶甲酯酶(PE)活性的测定已有2人参与

测定方法:取酶提取液2mL,37℃预热3min,加入酚酞指示剂2滴,加1%果胶8mL,用0.01mol/ L NaOH溶液滴定至淡红色,记录30min内其保持淡红色所消耗的NaOH溶液的体积。原理是:NaOH溶液中和酶液催化果胶释放的CH3O。
假设,30min内,各各试验组所加的8mL 1%果胶的果胶就被酶液完全催化分解,那么产生的CH3O就会成为一个固定值,那测定的结果就不怎么准确了。
还有,如果假设成立,那么在无法确定哪组酶液活性最高的情况下,怎么确定加入果胶的含量?
回复此楼
我已经开始怀念那些人,那些事了~
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

99503102

版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
windygo: 金币+5, 有帮助 2015-01-24 10:54:18
windygo: 金币+5, 有帮助 2015-01-26 09:32:22
楼主挺有想法的,但是我觉得你还是先把实验做一遍,看看实验结果是否和你假设的一样,很多东西实际上并不是我们想的那样的。当然,如果结果确实如楼主假设,大可添加果胶量,具体多少无所谓,但各个样品的添加量必须是一样的。
微信公众号:食安小屋
2楼2015-01-24 01:27:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

windygo

木虫 (正式写手)

咸蛋超人

引用回帖:
2楼: Originally posted by 99503102 at 2015-01-24 01:27:25
楼主挺有想法的,但是我觉得你还是先把实验做一遍,看看实验结果是否和你假设的一样,很多东西实际上并不是我们想的那样的。当然,如果结果确实如楼主假设,大可添加果胶量,具体多少无所谓,但各个样品的添加量必 ...

做了一组,待滴加NaOH溶液呈微红色5min后(在30min内),我又加了一些果胶溶液,结果红色消失。是否可以验证我上面的假设?
如果我在试验开始前,均将酶液稀释同样倍数,然后其余方法不变,那应该不会影响结果吧?
我已经开始怀念那些人,那些事了~
3楼2015-01-24 08:08:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

答非所问

荣誉版主 (职业作家)

ET.....

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
windygo: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-01-25 10:24:17
测酶活的时候有一个前提,底物一般是过量的,没有这个前提,各种假设都行不通~~~~~也就也是说,你的底物的量一定要多于30min酶解的量,还有你的酶的浓度你是可以调整的(稀释?),调整到一个适合的浓度。你就不需要调整果胶的浓度了
获取网盘密码请点击:http://emuch.net/bbs/box.php(复制之后,黏贴到浏览器地址栏)
4楼2015-01-24 10:19:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

windygo

木虫 (正式写手)

咸蛋超人

引用回帖:
4楼: Originally posted by 答非所问 at 2015-01-24 10:19:25
测酶活的时候有一个前提,底物一般是过量的,没有这个前提,各种假设都行不通~~~~~也就也是说,你的底物的量一定要多于30min酶解的量,还有你的酶的浓度你是可以调整的(稀释?),调整到一个适合的浓度。你就不需要 ...

又出现个问题,我按照原方法又测定了三组,加上昨天测的一组,共四组数据(均属于不同试验组),当滴定至呈现微红色不变时,所消耗的NaOH溶液的量是不一样的。最多的和最小的差别3mL。
滴定至微红色后,我滴加果胶溶液,红色仍会消失,说明酶液仍然存在,但是为什么中和酶液催化相同果胶溶液释放的CH3O,所消耗的NaOH溶液量不一样呢?
我要纠结疯了~
我已经开始怀念那些人,那些事了~
5楼2015-01-24 10:53:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

答非所问

荣誉版主 (职业作家)

ET.....

优秀版主

引用回帖:
5楼: Originally posted by windygo at 2015-01-24 10:53:11
又出现个问题,我按照原方法又测定了三组,加上昨天测的一组,共四组数据(均属于不同试验组),当滴定至呈现微红色不变时,所消耗的NaOH溶液的量是不一样的。最多的和最小的差别3mL。
滴定至微红色后,我滴加果胶 ...

亲,一般以你这种方法测得,都需要灭酶,文献中提到了这个问题吗??酶活只是没催化的速率!!!
获取网盘密码请点击:http://emuch.net/bbs/box.php(复制之后,黏贴到浏览器地址栏)
6楼2015-01-24 21:01:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 windygo 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 求Sci期刊推荐 10+4 甄小鱼 2024-05-30 7/350 2024-06-01 10:41 by bobvan
[教师之家] 双非本科毕业论文,气人 +6 河西夜郎 2024-05-27 7/350 2024-06-01 08:50 by Quakerbird
[硕博家园] 哈工大硕博招生!博士每月入学! +4 nailooo 2024-05-30 5/250 2024-06-01 06:47 by anevay
[考博] 导师不让硕转博,让我去国外读博,能理解吗? +11 萧山幽谷 2024-05-29 19/950 2024-05-31 21:32 by 萧山幽谷
[硕博家园] 每到中夜,情难自抑 +31 sioc-sunj 2024-05-28 55/2750 2024-05-31 19:44 by 独苦行僧
[论文投稿] 纠结选哪一个期刊,电化学领域 50+8 Freya163 2024-05-28 10/500 2024-05-31 15:09 by wzykobe
[基金申请] 离职后国自然项目不能变更单位,在新单位还能申请新的国自然项目吗 5+3 宜兰 2024-05-31 6/300 2024-05-31 12:05 by felicity6056
[考博] 24or25材料专业申博 +3 农夫三拳有点痛 2024-05-30 10/500 2024-05-31 11:17 by 安塔瓦拉多
[硕博家园] 求问endnote上Wiley引用格式在哪下载 +3 Elon. 2024-05-30 3/150 2024-05-31 10:13 by crazy peng
[文学芳草园] 对对子啊 +5 天若孤独 2024-05-29 7/350 2024-05-31 09:00 by wjykycg
[论文投稿] 高手朋友推荐比较容易投稿和录用的SCI期刊,不投稿收费SC,对分区没有要求 5+3 xintangren 2024-05-28 4/200 2024-05-29 10:46 by xintangren
[基金申请] E10开始送了,希望有好运 +5 sail 2024-05-27 5/250 2024-05-28 18:36 by 芝小芝
[论文投稿] EI期刊审稿人邮箱问题 5+3 shier妈妈 2024-05-27 4/200 2024-05-28 14:53 by topedit
[有机交流] 奇怪的物质 100+4 桃桃PXS 2024-05-27 7/350 2024-05-28 10:22 by 091602
[材料综合] 求助,刚入门MOF合成,实验总是失败 20+3 张月半 2024-05-25 8/400 2024-05-28 09:20 by 我想更懂你29
[基金申请] 面上基金会评专家,有回避机制吗? +4 huang1991js 2024-05-27 4/200 2024-05-27 19:08 by 星火12
[硕博家园] 我是很理想化一人 +6 hahamyid 2024-05-26 6/300 2024-05-27 18:13 by 大飞鱼鱼鱼
[基金申请] 感觉自然基金限制通过比例就是有点扯,学学B口,化学学部,不限制比例。 +10 wsjing 2024-05-26 14/700 2024-05-27 11:57 by kanmiaolucky
[硕博家园] 周日 +6 1加油哦棒 2024-05-26 9/450 2024-05-27 10:30 by hahamyid
[硕博家园] 研0 +6 控制调剂yl 2024-05-25 11/550 2024-05-26 23:37 by sakuraai
信息提示
请填处理意见