24小时热门版块排行榜    

查看: 3483  |  回复: 5

windygo

木虫 (正式写手)

咸蛋超人

[求助] 关于果胶甲酯酶(PE)活性的测定 已有2人参与

测定方法:取酶提取液2mL,37℃预热3min,加入酚酞指示剂2滴,加1%果胶8mL,用0.01mol/ L NaOH溶液滴定至淡红色,记录30min内其保持淡红色所消耗的NaOH溶液的体积。原理是:NaOH溶液中和酶液催化果胶释放的CH3O。
假设,30min内,各各试验组所加的8mL 1%果胶的果胶就被酶液完全催化分解,那么产生的CH3O就会成为一个固定值,那测定的结果就不怎么准确了。
还有,如果假设成立,那么在无法确定哪组酶液活性最高的情况下,怎么确定加入果胶的含量?
回复此楼
我已经开始怀念那些人,那些事了~
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

99503102

版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
windygo: 金币+5, 有帮助 2015-01-24 10:54:18
windygo: 金币+5, 有帮助 2015-01-26 09:32:22
楼主挺有想法的,但是我觉得你还是先把实验做一遍,看看实验结果是否和你假设的一样,很多东西实际上并不是我们想的那样的。当然,如果结果确实如楼主假设,大可添加果胶量,具体多少无所谓,但各个样品的添加量必须是一样的。
微信公众号:食安小屋
2楼2015-01-24 01:27:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

windygo

木虫 (正式写手)

咸蛋超人

引用回帖:
2楼: Originally posted by 99503102 at 2015-01-24 01:27:25
楼主挺有想法的,但是我觉得你还是先把实验做一遍,看看实验结果是否和你假设的一样,很多东西实际上并不是我们想的那样的。当然,如果结果确实如楼主假设,大可添加果胶量,具体多少无所谓,但各个样品的添加量必 ...

做了一组,待滴加NaOH溶液呈微红色5min后(在30min内),我又加了一些果胶溶液,结果红色消失。是否可以验证我上面的假设?
如果我在试验开始前,均将酶液稀释同样倍数,然后其余方法不变,那应该不会影响结果吧?
我已经开始怀念那些人,那些事了~
3楼2015-01-24 08:08:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

答非所问

荣誉版主 (职业作家)

ET.....

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
windygo: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-01-25 10:24:17
测酶活的时候有一个前提,底物一般是过量的,没有这个前提,各种假设都行不通~~~~~也就也是说,你的底物的量一定要多于30min酶解的量,还有你的酶的浓度你是可以调整的(稀释?),调整到一个适合的浓度。你就不需要调整果胶的浓度了
获取网盘密码请点击:http://emuch.net/bbs/box.php(复制之后,黏贴到浏览器地址栏)
4楼2015-01-24 10:19:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

windygo

木虫 (正式写手)

咸蛋超人

引用回帖:
4楼: Originally posted by 答非所问 at 2015-01-24 10:19:25
测酶活的时候有一个前提,底物一般是过量的,没有这个前提,各种假设都行不通~~~~~也就也是说,你的底物的量一定要多于30min酶解的量,还有你的酶的浓度你是可以调整的(稀释?),调整到一个适合的浓度。你就不需要 ...

又出现个问题,我按照原方法又测定了三组,加上昨天测的一组,共四组数据(均属于不同试验组),当滴定至呈现微红色不变时,所消耗的NaOH溶液的量是不一样的。最多的和最小的差别3mL。
滴定至微红色后,我滴加果胶溶液,红色仍会消失,说明酶液仍然存在,但是为什么中和酶液催化相同果胶溶液释放的CH3O,所消耗的NaOH溶液量不一样呢?
我要纠结疯了~
我已经开始怀念那些人,那些事了~
5楼2015-01-24 10:53:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

答非所问

荣誉版主 (职业作家)

ET.....

优秀版主

引用回帖:
5楼: Originally posted by windygo at 2015-01-24 10:53:11
又出现个问题,我按照原方法又测定了三组,加上昨天测的一组,共四组数据(均属于不同试验组),当滴定至呈现微红色不变时,所消耗的NaOH溶液的量是不一样的。最多的和最小的差别3mL。
滴定至微红色后,我滴加果胶 ...

亲,一般以你这种方法测得,都需要灭酶,文献中提到了这个问题吗??酶活只是没催化的速率!!!
获取网盘密码请点击:http://emuch.net/bbs/box.php(复制之后,黏贴到浏览器地址栏)
6楼2015-01-24 21:01:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 windygo 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] filecode +9 等待解的谜 2026-08-06 13/650 2026-08-06 20:42 by Vivilian
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 听说今天filecode变了 +13 布布和一二 2026-08-06 26/1300 2026-08-06 20:26 by 超级海虾
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 6/300 2026-08-06 20:19 by 苏知砚
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +3 archvillain 2026-08-06 6/300 2026-08-06 20:11 by olivermiaoer
[基金申请] 基金中了 +4 laoda193707 2026-08-06 4/200 2026-08-06 18:56 by olivermiaoer
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备? 50+3 kf2781974 2026-07-31 12/600 2026-08-06 15:11 by eddyin
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[教师之家] 咨询面上基金 +4 李长云 2026-07-31 7/350 2026-08-06 11:20 by 李长云
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的,举个手。玩一下,释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 面上再次挂了,太难了,躺也躺不了,倦也卷不过,小学校之殇! +22 低垂的野花 2026-07-31 30/1500 2026-08-05 18:03 by 低垂的野花
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 有没有H口的?有收到消息的吗? +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[论文投稿] 十年后又回来了,论文投稿求助 +3 哈哈114477 2026-08-01 3/150 2026-08-04 15:40 by tegsgjy20
[基金申请] 纯娱乐,不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 面上提前没消息,有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 娱乐 +4 Tide man 2026-08-03 4/200 2026-08-04 11:51 by wgch518
[基金申请] 什么时候能放榜呀? +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
请填处理意见