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2015考研的

银虫 (小有名气)

[求助] HPLC-ELSD法制备可溶性糖

本人刚接触高效液相色谱,流动相为已腈和水,流速为0. 8ml/min。将5mg/ml的半乳糖在25%水的恒梯度下走样30min,在11min出现一个面积为900的峰. 同一个样在24%水的恒梯度下走一针,峰出现位置后移,峰面积变为300。同一个样在23%水恒梯度,22%谁恒梯度,21%水恒梯度,20%水恒梯度走样。出现的峰位置均向后移,而且峰面积均有明显减小,而且在20%水恒梯度下,面积只有个位数。以前有听说有机相(已腈)含量越高,可溶性糖溶解性越差。各位虫友,这是怎麽回事,一般浓度一定的话,峰面积不会随梯度变化很多吧!怎麽回事,怎麽回事啊啊啊啊啊啊
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

1. 没有恒梯度这种提法,如果比例不变的话称之为等度。
2. 是乙腈,不是已腈。
3. 流动相比例不同会影响出峰面积、峰形、保留时间等。通常情况下乙腈比例越高出峰越早,你的情况相反,我建议你先确认一下那个峰是否是半乳糖的峰,再就是漂移管是否有污染。半乳糖可以溶于乙腈。
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
2楼2015-01-16 22:05:27
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2015考研的

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by archbishop at 2015-01-16 22:05:27
1. 没有恒梯度这种提法,如果比例不变的话称之为等度。
2. 是乙腈,不是已腈。
3. 流动相比例不同会影响出峰面积、峰形、保留时间等。通常情况下乙腈比例越高出峰越早,你的情况相反,我建议你先确认一下那个峰是 ...

我用的是prevail糖柱,几个月下来发现水的比例越大,出峰越快。还有就是,这两天发现漂移管确实有污染,因为同一种糖,相同浓度下,峰面积由1400变为了200。漂移管污染会有影响吗?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2015-01-17 10:37:28
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

引用回帖:
3楼: Originally posted by 2015考研的 at 2015-01-17 10:37:28
我用的是prevail糖柱,几个月下来发现水的比例越大,出峰越快。还有就是,这两天发现漂移管确实有污染,因为同一种糖,相同浓度下,峰面积由1400变为了200。漂移管污染会有影响吗?
...

原来你用的是糖柱。漂移管污染会有影响的。

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雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
4楼2015-01-17 12:23:47
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2015考研的

银虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by archbishop at 2015-01-17 12:23:47
原来你用的是糖柱。漂移管污染会有影响的。...

好的,这两天应该就有人来洗漂移管了,谢谢啊!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2015-01-17 14:49:26
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