版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

su-qiong

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 12
帖子: 7
在线: 1.5小时
虫号: 2820648
注册: 2013-11-22
专业: 生物大分子结构与功能

[求助] 重组质粒大小变小！求帮解答~ 已有2人参与

原来的质粒大小有5033bp，用SphI和KpnI分步酶切后（先用KpnI切，再用SphI切），用T4连接酶与目的片段1809bp（也用这两个酶酶切过）进行连接。之后进行转化。做菌液PCR时能P出目的条带，提质粒，电泳验证后发现质粒大小变成4000多bp。为什么质粒大小变小了，但又能PCR出目的条带呢？？？求解答。谢谢！

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

关于质粒载体PCR目的基因片段大小的要求已经有10人回复
质粒PCR产物片段大小问题已经有15人回复
pET系列的质粒怎么提？？？已经有14人回复
单酶切呈线性后重组质粒的大小变吗已经有4人回复
提出的质粒跑胶大小偏差严重，单切后跑胶大小正常，请问这现象正常吗？已经有5人回复
质粒大小对转化的影响已经有5人回复
请问同样大小的不同质粒，跑出来的DNA胶为什么参差不齐呢？已经有11人回复
空质粒双酶切后大小不对，纠结！已经有11人回复
质粒大小如何检测已经有21人回复
一个4.9kb的质粒以nm为单位的大小问题？已经有13人回复
质粒PCR大小正确，可是双酶切切不开已经有8人回复
大质粒的大小（bp）通常如何检测已经有5人回复
求助：如何估算混合有机溶剂的极性大小呢？请各路好友帮忙解答已经有5人回复
【求助/交流】怎么判断质粒的大小已经有3人回复

1楼 2014-12-18 19:10:20

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

1205yli

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 14.3
帖子: 6
在线: 3.4小时
虫号: 3656439
注册: 2015-01-21
性别: GG
专业: 环境微生物学

【答案】应助回帖

同求，为什么原始质粒比重组质粒跑得还慢

2楼2015-04-30 16:00:05

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

nbadlq

铁虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 121.1
散金: 10
帖子: 25
在线: 17.7小时
虫号: 2915036
注册: 2014-01-05
性别: GG
专业: 微生物生理与生物化学

【答案】应助回帖

酶切了吗，有目的条带吗。我最近做连接转化也出现了这种问题，重组质粒小于原质粒，探索中

3楼2015-10-26 16:58:03

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

小秀子子

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 165.5
散金: 5
帖子: 14
在线: 3.9小时
虫号: 4236907
注册: 2015-11-21
专业: 植物生理与生化

我最近用SphI和KpnI酶切质粒5400bp和目的片段1431bp，用T4连接酶进行连接，之后转化，板长得很正常，但是菌液PCR时不能P出目的条带，已经重复好几次了，是否有什么高见？

4楼2016-03-21 15:23:32

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主 su-qiong 的主题更新