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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 重组质粒大小变小！求帮解答~
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su-qiong

新虫 (初入文坛)

[求助] 重组质粒大小变小！求帮解答~ 已有2人参与

原来的质粒大小有5033bp，用SphI和KpnI分步酶切后（先用KpnI切，再用SphI切），用T4连接酶与目的片段1809bp（也用这两个酶酶切过）进行连接。之后进行转化。做菌液PCR时能P出目的条带，提质粒，电泳验证后发现质粒大小变成4000多bp。为什么质粒大小变小了，但又能PCR出目的条带呢？？？求解答。谢谢！
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1楼 2014-12-18 19:10:20
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1205yli

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

同求，为什么原始质粒比重组质粒跑得还慢
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2楼2015-04-30 16:00:05
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nbadlq

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

酶切了吗，有目的条带吗。我最近做连接转化也出现了这种问题，重组质粒小于原质粒，探索中
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3楼2015-10-26 16:58:03
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小秀子子

新虫 (初入文坛)
我最近用SphI和KpnI酶切质粒5400bp和目的片段1431bp，用T4连接酶进行连接，之后转化，板长得很正常，但是菌液PCR时不能P出目的条带，已经重复好几次了，是否有什么高见？
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4楼2016-03-21 15:23:32
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