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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问同样大小的不同质粒，跑出来的DNA胶为什么参差不齐呢？
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djyqlzky

新虫 (初入文坛)

[交流] 请问同样大小的不同质粒，跑出来的DNA胶为什么参差不齐呢？

如图，两批样是同样大小的不同质粒，共34个，大小都是7800左右，浓度有差别，分别为50-400不等，可是为什么我跑出来的带参差不齐呢？是因为没有酶切吗？

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1楼 2013-01-23 14:10:35
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yesali

木虫 (正式写手)
★
djyqlzky(金币+1): 谢谢参与
提取的质粒，不同的构象，在跑胶时，迁移率是不一样的
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4楼2013-01-23 16:23:53
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普通回帖

cdl007

木虫 (正式写手)
★
djyqlzky(金币+1): 谢谢参与
同问，这个俺也遇到过，百思不得其解，求虫友详解
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2楼2013-01-23 14:42:05
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白色风车123

银虫 (小有名气)
★
djyqlzky(金币+1): 谢谢参与
是不是提取的质粒的构象不一样所构成的。
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3楼2013-01-23 15:07:48
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eargle

银虫 (小有名气)
★
djyqlzky(金币+1): 谢谢参与
楼上说的可能是其中的原因。我认为主要是每个样的浓度有差异，也可能跟你做的胶不匀有关的。若有明显的单条带，不会影响你的分析结果的。
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5楼2013-01-25 11:54:10
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616057157

铜虫 (小有名气)
★
djyqlzky(金币+1): 谢谢参与
如楼上所述，质粒构象有3种，你提取过程中可能会多多少少的造成破坏，迁移率就可能不一样了。或者是胶的问题，本人觉得可能性不大，胶应该是能做均匀的。
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6楼2013-01-25 12:16:39
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yongbo_liang

新虫 (小有名气)
★
djyqlzky(金币+1): 谢谢参与
浓度的问题
你把浓度都调成相同，再电泳就不会那样了。
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7楼2013-01-25 13:27:55
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zhang881007

金虫 (小有名气)
★
djyqlzky(金币+1): 谢谢参与
因为你的条带浓度不一，我个人倾向于从离子强度上照原因
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8楼2013-01-25 15:05:06
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cxt86

金虫 (小有名气)
★
djyqlzky(金币+1): 谢谢参与
质粒空间构象多样，跑胶条带不一致常遇见，酶切之后一般就会正常了
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9楼2013-01-25 16:43:33
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haitian0625

金虫 (小有名气)
★
djyqlzky(金币+1): 谢谢参与
应该酶切跑胶的。
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10楼2013-01-25 18:35:44
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lidonghong

金虫 (正式写手)
正常情况下质粒应该是三条带，其次质粒的构象不一样，自然就影响他的电泳速度
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12楼2013-01-26 10:37:53
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licong952711楼
2013-01-25 18:43   回复  
djyqlzky(金币+1): 谢谢参与
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