24小时热门版块排行榜    

查看: 1777  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

[求助] 需要做一段120-150bp的双链DNA 已有1人参与

需要做一段120-150bp的双链DNA,没有模板可以用
公司说最多只能合成60nt的单链,怎么设计PCR反应把这个双链扩出来呢?引物用多少没关系,步骤不要太多
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gangouyang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fuyuandj86: 金币+20, ★★★很有帮助 2014-12-17 00:55:22
三条60bp的单链,1和3是正链,2是反链,注意需要overlap,1和2退火,再1+2和3退火,可以得到类似双链的模板产物,用此产物作模板,注意不要做胶收回。
再用一对引物,PCR,应该是可以达到目的的。
4楼2014-12-16 14:41:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

小小cool

金虫 (正式写手)

这个直接全基因合成就行啊,我们可以的

[ 发自手机版 https://muchong.com/3g ]
2楼2014-12-16 07:40:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小小cool at 2014-12-15 11:40:50
这个直接全基因合成就行啊,我们可以的

我老板是铁公鸡啊~~~伊肯定不会让我去找公司做合成的
最简单的方法当然是随便找个双链的片段,然后一点点接引物往外延长出去~
最后再把延长出来的片段单独扩出来,只是觉得太麻烦了
大片段连接也做过,只是这片段实在是不大不小
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
3楼2014-12-16 12:13:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小cool

金虫 (正式写手)

嗯,楼上的方法很好啊,可以试试

[ 发自手机版 https://muchong.com/3g ]
5楼2014-12-16 18:47:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +7 majunge000 2026-08-11 9/450 2026-08-15 13:34 by kiz2011
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 HFw0lei2R37i 2026-08-14 9/450 2026-08-15 11:33 by KxMI1BYBxWX1
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 7lpolszZVXgi 2026-08-14 6/300 2026-08-15 09:28 by sunzitan
[基金申请] filecode +7 cratir 2026-08-14 11/550 2026-08-15 06:19 by 学员8dgXkO
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 02:21 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +11 Tide man 2026-08-10 12/600 2026-08-15 02:12 by home3163
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 01:28 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 22/1100 2026-08-14 23:45 by Noways
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
信息提示
请填处理意见