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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

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[求助] 需要做一段120-150bp的双链DNA已有1人参与

需要做一段120-150bp的双链DNA，没有模板可以用
公司说最多只能合成60nt的单链，怎么设计PCR反应把这个双链扩出来呢？引物用多少没关系，步骤不要太多

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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.

1楼2014-12-16 06:25:06

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gangouyang

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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fuyuandj86: 金币+20, ★★★很有帮助 2014-12-17 00:55:22

三条60bp的单链，1和3是正链，2是反链，注意需要overlap，1和2退火，再1+2和3退火，可以得到类似双链的模板产物，用此产物作模板，注意不要做胶收回。
再用一对引物，PCR，应该是可以达到目的的。

4楼2014-12-16 14:41:27

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