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牛牛洲

铜虫 (初入文坛)

[求助] 关于溶菌酶溶解大肠杆菌 已有2人参与

我在实验中想要用溶菌酶来裂解大肠杆菌(杀死),使用生工的lysozyme。请问下应该怎么使用?是直接溶解到水里面然后再加到离心下来的大肠杆菌沉淀上吗?  我这样试过,但是感觉细菌没有被溶解,就是说加了溶菌酶后,菌液的没有变得澄清。 我大肠杆菌是稀释到OD600 = 1.0 的浓度下加的溶菌酶,溶菌酶终浓度大概1mg/ml。请问下各位大牛,加入溶菌酶后,菌液会变澄清吗?我该怎样改进一下条件?
敬请各位大神解答,万分感谢O(∩_∩)O~
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卡卡罗特zxg

金虫 (小有名气)

楼主解决了吗?我的溶菌酶溶液不知道该怎么用
4楼2017-07-10 15:24:04
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alicelchf

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

今天在实验室也遇到了同样的问题,因为这个实验室没有合适的超生破碎仪器,所以等明天我得出来纯化结果告诉你有没有影响吧,我的裂解液加入溶菌酶反应之后也没有见到澄清。
修身、齐家、治国、平天下
2楼2014-12-16 05:51:32
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

话说,光用溶菌酶的话,想要裂解大肠杆菌不容易吧,一般都是SDS处理或者超声破碎
而且溶菌酶也是有相应的溶菌酶buffer的,最好是大肠杆菌离心去掉培养基之后,再把溶解了溶菌酶的buffer重悬菌体
3楼2014-12-16 14:50:43
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