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爱琴海的火

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助酵母双杂交的问题! 已有2人参与

请教关于酵母双杂交的问题,请大家帮助解答!谢谢!
1、构建酵母双杂交系统的时候,选择诱饵基因,是否可以选择目的基因的CDS区域(即为保守区,从ATG开始,一个完整的ORF);
2、利用目的基因为诱饵基因,在通过酵母双杂交筛选,具有杂交信号的即为与目的基因互作的蛋白,其中是否包括与目的基因作用的转录因子(在杂交信号中进行筛选)?
3、是否有其他的方法可以筛选与目的基因互作的转录因子?
谢谢!
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
从你这三个问题上看,你还得回去看看操作手册的原理部分,你到底是想做双杂还是单杂?

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-12-07 18:28:39
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爱琴海的火

新虫 (初入文坛)

当然是做双杂交,前两个问题是想咨询如果做双杂交这样的操作是否正确?如果想钓取转录因子用这个方法是否可以?
3楼2014-12-08 08:38:50
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
做酵母双杂就需要选择目的基因的CDS区域编码序列。只要与你的蛋白互做的通过双杂就可以筛出来。你也可以构建蛋白标签比如(MYC,His)等筛选。
hehe
4楼2014-12-08 08:58:01
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