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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助酵母双杂交的问题！
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爱琴海的火

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助酵母双杂交的问题！ 已有2人参与

请教关于酵母双杂交的问题，请大家帮助解答！谢谢！
1、构建酵母双杂交系统的时候，选择诱饵基因，是否可以选择目的基因的CDS区域（即为保守区，从ATG开始，一个完整的ORF）；
2、利用目的基因为诱饵基因，在通过酵母双杂交筛选，具有杂交信号的即为与目的基因互作的蛋白，其中是否包括与目的基因作用的转录因子（在杂交信号中进行筛选）？
3、是否有其他的方法可以筛选与目的基因互作的转录因子？
谢谢！
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1楼 2014-12-07 17:11:18
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
从你这三个问题上看，你还得回去看看操作手册的原理部分，你到底是想做双杂还是单杂？

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-12-07 18:28:39
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爱琴海的火

新虫 (初入文坛)
当然是做双杂交，前两个问题是想咨询如果做双杂交这样的操作是否正确？如果想钓取转录因子用这个方法是否可以？
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3楼2014-12-08 08:38:50
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
做酵母双杂就需要选择目的基因的CDS区域编码序列。只要与你的蛋白互做的通过双杂就可以筛出来。你也可以构建蛋白标签比如（MYC，His)等筛选。
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hehe
4楼2014-12-08 08:58:01
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