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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的培养
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巴山夜雨YJ

银虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的培养

本人采用的培养方法是：先在无菌的平板中加入1ml菌液，再倒入固体培养基，然后立即混匀，等待凝固，做材料的抑菌检测。培养大肠杆菌和金黄色葡萄球菌
存在问题：1.24h培养后发现菌落又密又小，借着光才能看见。可我记得以前做大肠杆菌划线接种的时候菌落还是挺大的。
                  想请问一下大家是怎么操作的呢，如果用涂布法呢，两者是一样的么？
                  2.在操作过程中，感觉倒完平板，等了很长时间发现还是未完全凝固，24后发现平板中整块固体培养基都凹凸不平，是因为倒平板时，固体培养基温度低了，已经开始有些冷凝的缘故嘛？

求教求教各位的指导，感激感激
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1楼 2014-11-29 17:07:05
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

云忠听雨

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
巴山夜雨YJ: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-12-03 19:04:42
怎么会想到用倾注法的，这两个菌是好氧菌吧，氧气条件抑制，长得会小一些吧（相较于涂布）无图无真相，温度太低才导致表面不平，又怕温度太高杀死菌株，那为啥不用涂布试一试。要做抑菌检测，培养基里加了料？
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巴山夜雨YJ
5楼2014-12-03 09:27:30
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普通回帖

巴山夜雨YJ

银虫 (小有名气)
生长24后观察无异样，48后拿出观察有的平板整个四周都是一圈白白的，是污染的杂菌么？
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2楼2014-12-01 09:02:01
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巴山夜雨YJ

银虫 (小有名气)
求师兄师姐们指导交流~~
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3楼2014-12-02 10:23:53
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
巴山夜雨YJ: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-12-03 16:16:48
有照片没？
倒平板时如果培养基已经有结块凝固现象，倒出来肯定会不平，这个很有可能是温度太低的问题。
菌落太多可以减少菌液量或稀释菌液，无论你这样做的还是涂布，均数都要控制好
菌落刚开始就是很小的白点，长得时间久点菌落才会大些
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4楼2014-12-02 21:15:33
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巴山夜雨YJ

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by laozuzunzhe at 2014-12-02 18:15:33
有照片没？
倒平板时如果培养基已经有结块凝固现象，倒出来肯定会不平，这个很有可能是温度太低的问题。
菌落太多可以减少菌液量或稀释菌液，无论你这样做的还是涂布，均数都要控制好
菌落刚开始就是很小的白点， ...

是的是的～～可能操作时间太长，培养基有点凝固，所以才会不平。
时间久一点是。。。
这两个菌的生长周期不是２４ｈ吗？我觉得２４ｈ和４８ｈ后生长情况好像没有太大的差别
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6楼2014-12-03 16:16:02
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巴山夜雨YJ

银虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by 云忠听雨 at 2014-12-03 06:27:30
怎么会想到用倾注法的，这两个菌是好氧菌吧，氧气条件抑制，长得会小一些吧（相较于涂布）无图无真相，温度太低才导致表面不平，又怕温度太高杀死菌株，那为啥不用涂布试一试。要做抑菌检测，培养基里加了料？

我是做材料抗菌性能的实验
明白了～那使用倾注法长得菌是只长在培养基的表面还是培养基的内部也在长呢？

（跟你说声ｓｏｒｒｙ，本来要给金币的，不知道出了什么问题，总提示范围超出限制，所以就全给楼上了
送你一朵大红花，谢谢你的回复～～）
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7楼2014-12-03 16:22:58
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 巴山夜雨YJ at 2014-12-03 16:22:58
我是做材料抗菌性能的实验
明白了～那使用倾注法长得菌是只长在培养基的表面还是培养基的内部也在长呢？

（跟你说声ｓｏｒｒｙ，本来要给金币的，不知道出了什么问题，总提示范围超出限制，所以就全给楼上了
...

因为你初始悬赏金币只有10金币，还全给我了，所以没金币给别人了呵呵，可以追加悬赏金币，然后再给别人评分奖励金币。
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8楼2014-12-03 16:28:18
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 巴山夜雨YJ at 2014-12-03 16:16:02
是的是的～～可能操作时间太长，培养基有点凝固，所以才会不平。
时间久一点是。。。
这两个菌的生长周期不是２４ｈ吗？我觉得２４ｈ和４８ｈ后生长情况好像没有太大的差别...

大肠在厌氧下也能生长，你的方法是厌氧培养了，涂布的话能很好的接触氧气。用涂布法的话就会生长快很多，从保藏箱取出的菌种不到24h（大概十几个小时）就能长很多，而经过一级活化的菌种就更快了，12h左右就能长好多了。
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9楼2014-12-03 16:33:35
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云忠听雨

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 巴山夜雨YJ at 2014-12-03 16:22:58
我是做材料抗菌性能的实验
明白了～那使用倾注法长得菌是只长在培养基的表面还是培养基的内部也在长呢？

（跟你说声ｓｏｒｒｙ，本来要给金币的，不知道出了什么问题，总提示范围超出限制，所以就全给楼上了
...

我主要做酵母菌，属兼性厌氧，所以倾注法培养基内部也可以长，我做倾注法是检测样品中微生物量的，不需要表面长菌，一般待平板凝固后还需倒上5ml琼脂。
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10楼2014-12-03 17:11:05
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