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tjlcqlf

木虫 (小有名气)

山野村夫

[求助] 关于DNA的溶解

求助各位大神,本人最近接触到有关DNA的工作内容。有批好七八年前提取的小牛胸腺DNA样品,密封干燥后置于室温保存,最近想用来试试能否继续使用,在溶解的时候,用Tris-HCl(PH=7.4)、纯化水等均不能溶解,65℃也加热了,还是不溶。根据文献资料初步判断为样品过度干燥(保存时有放变色硅胶吸水保持干燥)导致,请教各位这种分析是否正确,以及有没有什么办法可以使其溶解。
另:DNA样品的纯度没问题,刚提取出来的时候溶解很好。

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向上,向善
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早上九点半

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我以前也配置过,就用的Tris,然后封存,放在广口瓶里,在4°C的冰箱里放置一夜,第二天就溶解了。这个需要的时间比较长,你不要着急,希望有帮助。
5楼2014-12-03 08:40:04
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普通回帖

wolfghost

版主 (知名作家)

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

木虫内有相同的问题,也有回复,楼主参考!!
链接如下:https://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=7306079
大刀向鬼子的头上砍去!ChopJapstoDeath!
2楼2014-11-26 23:19:05
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tjlcqlf

木虫 (小有名气)

山野村夫

引用回帖:
2楼: Originally posted by wolfghost at 2014-11-26 23:19:05
木虫内有相同的问题,也有回复,楼主参考!!
链接如下:https://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=7306079

看了 不能解决问题啊
向上,向善
3楼2014-11-26 23:53:35
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mao816816

木虫之王 (文坛精英)

文献杰出贡献

【答案】应助回帖

https://wenku.baidu.com/link?url ... nJdCkQIcfLRu14QAECe
你看看人家的处理过程吧,可能你样品没有处理好,时间长了蛋白质变性了。
4楼2014-11-28 16:07:03
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zzyzxup

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们实验室DNA是放在冰箱中低温保存的。然后,DNA不易溶于水,溶解是要装在衣服内兜里随身携带随时震荡,晚上睡觉放被子里保温。要多次分步溶解。

[ 发自小木虫客户端 ]
努力才有未来。
6楼2014-12-05 20:50:55
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tjlcqlf

木虫 (小有名气)

山野村夫

引用回帖:
6楼: Originally posted by zzyzxup at 2014-12-05 20:50:55
我们实验室DNA是放在冰箱中低温保存的。然后,DNA不易溶于水,溶解是要装在衣服内兜里随身携带随时震荡,晚上睡觉放被子里保温。要多次分步溶解。

  别乱说,DNA在水中的溶解度不错的 ,我们曾经做到10g/L的浓度
向上,向善
7楼2014-12-06 22:21:46
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tjlcqlf

木虫 (小有名气)

山野村夫

基本搞清楚了 ,样品放太久,过度干燥,目前基本没有办法解决。回复怀疑DNA溶解性、样品制备过程、样品纯度、溶解时间、溶解温度因素影响的童鞋就算了 ,没建设性意见。
向上,向善
8楼2014-12-06 22:25:45
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zzyzxup

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by tjlcqlf at 2014-12-06 22:21:46
  别乱说,DNA在水中的溶解度不错的 ,我们曾经做到10g/L的浓度...

我说的不易溶是溶解的慢,不是浓度小。。。。。

[ 发自小木虫客户端 ]
努力才有未来。
9楼2014-12-07 09:48:37
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zzyzxup

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by tjlcqlf at 2014-12-06 22:25:45
基本搞清楚了 ,样品放太久,过度干燥,目前基本没有办法解决。回复怀疑DNA溶解性、样品制备过程、样品纯度、溶解时间、溶解温度因素影响的童鞋就算了 ,没建设性意见。

样品过度干燥,所以要在溶解时间、溶解温度上下功夫。解决这一问题呀。

[ 发自小木虫客户端 ]
努力才有未来。
10楼2014-12-07 09:50:37
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