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疯狂的bamboo

铜虫 (小有名气)

[求助] OD值表示抗体效价科学吗?急急急急 已有2人参与

问题如题,请问抗体效价如何表示,我一开始是准备直接倍比稀释,得出抗体效价后直接表示的,但是问题来了,组内的抗体效价差异很大,比如说我用2的倍比稀释,最后得出的效价可能是:16 64 32等等,不好进行组间比较,我查阅了文献,有的文章说可以直接将血清稀释到一定的倍数,测定OD值,用OD值进行表示

那么我的问题是:用OD值表示抗体效价对具体的稀释倍数有要求吗?这样的表示方法科学吗???
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limichuan

金虫 (正式写手)

免疫学实验超人qq:858200882

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
疯狂的bamboo: 金币+5, 有帮助 2014-11-25 22:06:17
没听太懂你的意思,我说下我们怎定义效价吧:我们通常定义效价的时候用的是已经标记好的抗体,然后梯度稀释,反应测OD,OD在1.6~2.0附件的稀释度来定义。
本公司专业从事蛋白纯化,抗体制备等免疫实验技术服务。欢迎咨询qq:858200882
2楼2014-11-25 21:36:04
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疯狂的bamboo

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by limichuan at 2014-11-25 21:36:04
没听太懂你的意思,我说下我们怎定义效价吧:我们通常定义效价的时候用的是已经标记好的抗体,然后梯度稀释,反应测OD,OD在1.6~2.0附件的稀释度来定义。

打个比方说我做10倍,100倍,1000倍稀释的时候,OD值可能都处于1.6-2.0之间啊,这该怎么确定呢,而且每组可能都有超过5个以上的数据,就会有5个以上的结果,组间比较效价差异的时候就会变得很困难的,所以我在看文献的时候看到有的就稀释到比如说2000倍,测定OD值分析差异,实验组的OD数据差不多在0.5左右,所以我奇怪对稀释度有没有具体要求的?还是必须保证OD在0.5左右的
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3楼2014-11-25 22:11:18
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limichuan

金虫 (正式写手)

免疫学实验超人qq:858200882

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
疯狂的bamboo: 金币+5, 有帮助 2014-11-26 09:23:13
我想你应该没有做过这方面大量的实验,你说的第一种情况几乎不存在,最多也就两个稀释度可能出现在这个OD范围内,一般倾向为计算OD接近2.0的时候的稀释倍数。
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4楼2014-11-26 08:52:42
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疯狂的bamboo

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by limichuan at 2014-11-26 08:52:42
我想你应该没有做过这方面大量的实验,你说的第一种情况几乎不存在,最多也就两个稀释度可能出现在这个OD范围内,一般倾向为计算OD接近2.0的时候的稀释倍数。

我是第一次做抗体这块的 所以很多方面都不清楚,但是我看到论文中很多表示抗体滴度都是稀释一定倍数,OD0-1之间的,所以心存疑惑了
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5楼2014-11-26 09:24:35
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limichuan

金虫 (正式写手)

免疫学实验超人qq:858200882

【答案】应助回帖

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疯狂的bamboo: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢 2014-11-26 13:49:47
确实是这样,我给你说的方法是生产性企业一般的做法,这和科研是两个概念。还有就是至于OD值以多少为界限其实你是可以自己定的,这就像数学中的两个变量,我们去认为标定一个,来衡量另外一个变量的大小。
本公司专业从事蛋白纯化,抗体制备等免疫实验技术服务。欢迎咨询qq:858200882
6楼2014-11-26 12:53:52
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xiaxzhp

铜虫 (初入文坛)

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★ ★ ★ ★ ★
疯狂的bamboo: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-12-01 20:41:32
抗体效价只是一个大概的概念
同一个抗体,包被浓度不一样、酶浓度不一样,做出来的效价都会不一样的。
7楼2014-12-01 14:49:25
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