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[求助] 细胞成球总是成不了

最近在做U87MG的成球实验,总是成不了,成球培养基是DF-12+B27+EGF+bFGF+双抗,都是按照文献浓度加的,上周还能成,这周新配的就是成不了,离心后用PBS洗3遍,用成球培养基重悬,第二天看到细胞全部崩解了,瓶子里都是沙样的情况,唯一不同的就是细胞上周以前用的是商业化灌装培养基,上周以后用的是自己滤的培养基,滤器如果生锈或者前面使用的人在使用后没有仔细清洗,这种情况滤的培养基会不会影响细胞的状态,导致无法成球?成球的环境和成球的细胞是不是特备要求高,有轻微的干扰就会崩解?
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