应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 前成骨细胞2T3和后成骨细胞MLO-A5的诱导矿化为什么我老做不出来呢，求高人指点！
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
281/3返回列表123下一页
查看: 2501  |  回复: 27
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

fentaohao123

金虫 (小有名气)

[求助] 前成骨细胞2T3和后成骨细胞MLO-A5的诱导矿化为什么我老做不出来呢，求高人指点！

我现在在做前成骨细胞2T3和后成骨细胞MLO-A5的诱导矿化实验，用的是文献中的的方法，可就是做不出来，不知道什么原因！求高人指点，先谢谢了！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

MC3T3

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
努力，奋斗！
1楼 2013-07-04 22:17:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Super_M

木虫 (小有名气)
请给出方法，这样说没人能帮你。
赞一下 回复此楼
2楼2013-07-05 11:43:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fentaohao123

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Super_M at 2013-07-05 11:43:12
请给出方法，这样说没人能帮你。

2T3:培养基用的是α-MEM+10%FBS+1%的L-谷氨酰胺+1%的双抗，当细胞接种后彼此接触后（90%以上），开始诱导，及补加ascorbic acid（浓度为100μg/mL）和β-甘油磷酸钠（浓度为5mM ），每两天换一次液，并分别在第7,14,21天茜素红s染色。可就是没有，要么染出来的就不是红色的，而是黑色片层状的！
A5的和上面的方法差不多，就是培养基中的血清变为5%FBS+5%BCS，染色时间变为第3,6,9天染色，而且然不出来。其他的都一样。
求指教。
赞一下 回复此楼
努力，奋斗！
3楼2013-07-05 16:27:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

妙语1989

金虫 (小有名气)
★ ★
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-07-17 21:49:23
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-07-18 00:51:14
引用回帖:
3楼: Originally posted by fentaohao123 at 2013-07-05 16:27:30
2T3:培养基用的是α-MEM+10%FBS+1%的L-谷氨酰胺+1%的双抗，当细胞接种后彼此接触后（90%以上），开始诱导，及补加ascorbic acid（浓度为100μg/mL）和β-甘油磷酸钠（浓度为5mM ），每两天换一次液，并分别在第7,1 ...

可以试试改变茜素红的pH，这个很重要
赞一下 回复此楼
4楼2013-07-16 21:03:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leechau2007

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-07-17 21:48:53
不是所有的β-甘油磷酸钠都可以诱导矿化的，建议使用sigma的，另外最好用G9422，这个是细胞培养专用的
赞一下 回复此楼
5楼2013-07-17 10:59:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

妙语1989

金虫 (小有名气)
★
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-07-17 21:49:15
引用回帖:
5楼: Originally posted by leechau2007 at 2013-07-17 10:59:54
不是所有的β-甘油磷酸钠都可以诱导矿化的，建议使用sigma的，另外最好用G9422，这个是细胞培养专用的

你们也做成骨诱导吗？不知道诱导的细胞会不会出现卷边的情况？我们的细胞在24孔板中都卷边了，破损严重，不知道有没有什么解决方案
赞一下 回复此楼
6楼2013-07-17 16:03:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leechau2007

木虫 (初入文坛)
★ ★
137167741: 金币+2, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-07-17 21:49:01
引用回帖:
6楼: Originally posted by 妙语1989 at 2013-07-17 16:03:24
你们也做成骨诱导吗？不知道诱导的细胞会不会出现卷边的情况？我们的细胞在24孔板中都卷边了，破损严重，不知道有没有什么解决方案...

我也做成骨诱导，我做的是血管平滑肌的成骨分化诱导，细胞出现卷的情况主要是增殖过度，可以考虑一下降低铺板的细胞密度，另外也可以降低培养基中血清的用量，减慢细胞的生长。我们以前买的β-甘油磷酸钠是sigma的细胞培养专用的，后来那个货号停产了就又随便买了一瓶sigma的，但是不是专门用来培养细胞的，钙化效果一般，测钙含量只有原来的三分之一左右。后来换了G9422，效果很好。
赞一下 回复此楼
7楼2013-07-17 19:25:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leechau2007

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-07-17 21:49:08
引用回帖:
3楼: Originally posted by fentaohao123 at 2013-07-05 16:27:30
2T3:培养基用的是α-MEM+10%FBS+1%的L-谷氨酰胺+1%的双抗，当细胞接种后彼此接触后（90%以上），开始诱导，及补加ascorbic acid（浓度为100μg/mL）和β-甘油磷酸钠（浓度为5mM ），每两天换一次液，并分别在第7,1 ...

你诱导的时候，细胞已经太密了，我们诱导都是40%左右就开始了，一般传代两天以后只要贴壁的细胞数量还可以就诱导。
赞一下 回复此楼
8楼2013-07-17 19:30:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

妙语1989

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by leechau2007 at 2013-07-17 19:25:21
我也做成骨诱导，我做的是血管平滑肌的成骨分化诱导，细胞出现卷的情况主要是增殖过度，可以考虑一下降低铺板的细胞密度，另外也可以降低培养基中血清的用量，减慢细胞的生长。我们以前买的β-甘油磷酸钠是sigma的 ...

谢谢，回头试试。
回复此楼
9楼2013-07-18 10:58:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fentaohao123

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by leechau2007 at 2013-07-17 10:59:54
不是所有的β-甘油磷酸钠都可以诱导矿化的，建议使用sigma的，另外最好用G9422，这个是细胞培养专用的

嗯，我用的就是sigma的。
赞一下 回复此楼
努力，奋斗！
10楼2013-07-20 14:25:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fentaohao123 的主题更新
281/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学 +18 妮妮ninicgb 2026-04-04 20/1000 2026-04-06 17:38 by 妮妮ninicgb
[考研] 336求调剂，一志愿中科大 +3 墨彧 yuyu 2026-04-06 3/150 2026-04-06 17:32 by dongzh2009
[考研] 材料与化工363求推荐 +9 zh096 2026-04-04 9/450 2026-04-06 17:13 by 尚水阁主
[考研] 307求调剂 +7 超级伊昂大王 2026-04-06 7/350 2026-04-06 17:12 by lijunpoly
[考研] 302分求调剂 一志愿安徽大学085601 +9 zyx上岸！ 2026-04-04 9/450 2026-04-06 13:05 by 猪会飞
[考研] 求调剂 +5 wos666 2026-04-03 5/250 2026-04-06 10:13 by 蓝云思雨
[考研] 085600，320分求调剂 +7 大馋小子 2026-04-01 8/400 2026-04-05 21:19 by 学员8dgXkO
[考研] 调剂 +5 好好读书。 2026-04-01 5/250 2026-04-05 17:54 by liucky
[考研] 085600调剂 +9 东照照照 2026-04-04 9/450 2026-04-05 13:44 by ujn_zhuj
[考研] 调剂 +3 好好读书。 2026-04-02 3/150 2026-04-05 13:02 by arrow8852
[考研] 312求调剂 +3 Say Never 2026-04-04 3/150 2026-04-05 11:19 by guoweigw
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +6 ioodiiij 2026-04-04 6/300 2026-04-05 10:09 by guoweigw
[考研] 309分085801求调剂 +11 MY_angel 2026-03-31 11/550 2026-04-04 19:11 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂 +3 农业工程与信息� 2026-04-04 3/150 2026-04-04 12:19 by 舍而后得
[考研] 材料与化工调剂一志愿大连海事085600，349 +11 吃的不少 2026-03-30 11/550 2026-04-03 18:05 by Jimmyandyou
[考研] 334求调剂 +9 Trying] 2026-03-31 9/450 2026-04-03 15:18 by 琢珥丶
[考研] 一志愿山东大学化学与化工学院材料与化工专硕，360分求调剂 +4 不愿透露姓名的� 2026-04-02 4/200 2026-04-03 09:29 by 遗忘消失的灆
[考研] 362求调剂 +14 西南交材料专硕3 2026-03-31 14/700 2026-04-02 17:50 by yunlongyang
[考研] 282求调剂 +13 呼吸都是减肥 2026-04-01 13/650 2026-04-02 14:10 by baoball
[考研] 省双一流重点一本大学招收调剂 +4 wwwwffffff 2026-03-31 7/350 2026-04-01 15:23 by wwwwffffff
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭