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fentaohao123

金虫 (小有名气)

[求助] 前成骨细胞2T3和后成骨细胞MLO-A5的诱导矿化为什么我老做不出来呢,求高人指点!

我现在在做前成骨细胞2T3和后成骨细胞MLO-A5的诱导矿化实验,用的是文献中的的方法,可就是做不出来,不知道什么原因!求高人指点,先谢谢了!
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努力,奋斗!
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妙语1989

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by leechau2007 at 2013-07-17 19:25:21
我也做成骨诱导,我做的是血管平滑肌的成骨分化诱导,细胞出现卷的情况主要是增殖过度,可以考虑一下降低铺板的细胞密度,另外也可以降低培养基中血清的用量,减慢细胞的生长。我们以前买的β-甘油磷酸钠是sigma的 ...

谢谢,回头试试。
9楼2013-07-18 10:58:08
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Super_M

木虫 (小有名气)

请给出方法,这样说没人能帮你。
2楼2013-07-05 11:43:12
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fentaohao123

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Super_M at 2013-07-05 11:43:12
请给出方法,这样说没人能帮你。

2T3:培养基用的是α-MEM+10%FBS+1%的L-谷氨酰胺+1%的双抗,当细胞接种后彼此接触后(90%以上),开始诱导,及补加ascorbic acid(浓度为100μg/mL)和β-甘油磷酸钠(浓度为5mM ),每两天换一次液,并分别在第7,14,21天茜素红s染色。可就是没有,要么染出来的就不是红色的,而是黑色片层状的!
A5的和上面的方法差不多,就是培养基中的血清变为5%FBS+5%BCS,染色时间变为第3,6,9天染色,而且然不出来。其他的都一样。
求指教。
努力,奋斗!
3楼2013-07-05 16:27:30
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妙语1989

金虫 (小有名气)

★ ★
137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-07-17 21:49:23
137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-07-18 00:51:14
引用回帖:
3楼: Originally posted by fentaohao123 at 2013-07-05 16:27:30
2T3:培养基用的是α-MEM+10%FBS+1%的L-谷氨酰胺+1%的双抗,当细胞接种后彼此接触后(90%以上),开始诱导,及补加ascorbic acid(浓度为100μg/mL)和β-甘油磷酸钠(浓度为5mM ),每两天换一次液,并分别在第7,1 ...

可以试试改变茜素红的pH,这个很重要
4楼2013-07-16 21:03:59
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