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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 综合其他 » 流式细胞仪测细胞周期，各个周期峰分不开，只有一个宽峰是什么原因？谢谢指点！！
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赖皮狗31350

银虫 (小有名气)

[求助] 流式细胞仪测细胞周期，各个周期峰分不开，只有一个宽峰是什么原因？谢谢指点！！

大家好！我最近在使用“细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒（PI染色测细胞周期）” 经流式细胞仪分析癌细胞周期，在认真按照操作说明的情况下（注，实验大体步骤如下：1、胰酶消化细胞，2、离心收集细胞，3、冷的PBS洗后离心，4、冷的70%乙醇固定12h，5、rna酶+PI染色，6、过400目筛。为什么只出现了单个峰，并且峰很宽？重复了几次，可每次每个样本都是如此。不知道是哪步出错了，请各位高人能予以指点。十分感谢啊！
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天道酬勤
1楼2012-09-03 21:48:25
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红舟流星

荣誉版主 (文坛精英)

志在成为千元户！

优秀版主优秀版主优秀版主
★
markar: 金币+1, 感谢回帖交流！ 2012-09-09 12:35:38
是不是培养时间太长了？
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红楼一梦终难寻扁舟载酒且慢行落花流水依惜别月伴明星照前路
2楼2012-09-03 23:05:21
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赖皮狗31350

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 红舟流星 at 2012-09-03 23:05:21
是不是培养时间太长了？

24h  应该还好吧  参阅的文献上都基本是24h,48h,有的甚至72h
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天道酬勤
3楼2012-09-04 08:52:37
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jiangmenghu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
红舟流星: 金币+1, 欢迎来到生物功能材料板块应助交流 2012-09-05 00:04:43
赖皮狗31350: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-09-09 10:07:58
红舟流星: 金币+2, 代扣代发金币 2012-12-09 00:50:01
如果是药或者别的什么作用于细胞，现在24h出现这种情况，可能对细胞的各个周期有影响，可以适当调节一下作用时间，减少作用时间，还有没有control组吗，看看control组的情况，如果control组没有问题，是你的产品问题，看还是否适合用细胞周期评价，如果control组也和之前的一样，那是细胞的问题
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4楼2012-09-04 21:37:19
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赖皮狗31350

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jiangmenghu at 2012-09-04 21:37:19
如果是药或者别的什么作用于细胞，现在24h出现这种情况，可能对细胞的各个周期有影响，可以适当调节一下作用时间，减少作用时间，还有没有control组吗，看看control组的情况，如果control组没有问题，是你的产品问题 ...

control组也是单峰  除了没有凋亡外  control和给药组的峰都是单的宽峰  另外 您说细胞的问题  请问能具体说名下么  十分感谢啊
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天道酬勤
5楼2012-09-05 16:44:58
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jiangmenghu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
markar: 金币+1, 感谢回帖交流！ 2012-09-09 12:35:57
红舟流星: 金币+1, 代扣代发金币 2012-12-09 00:50:06
我一般研究的是癌细胞，所以正常癌细胞表现出是4个周期，普通细胞应该没有四个周期，如果对照组也是单峰，是不是你的细胞培养的过程中，状态不是很好？如果细胞状态不好也会影响结果的
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6楼2012-09-05 18:33:09
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赖皮狗31350

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by jiangmenghu at 2012-09-05 18:33:09
我一般研究的是癌细胞，所以正常癌细胞表现出是4个周期，普通细胞应该没有四个周期，如果对照组也是单峰，是不是你的细胞培养的过程中，状态不是很好？如果细胞状态不好也会影响结果的

我最近也在研究癌细胞 Hela，和 MCF 我昨天才知道 管理我们所的流式细胞仪操是学生不懂细胞周期。请问能告诉我详细的仪器使用步骤么
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天道酬勤
7楼2012-09-08 00:13:20
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jiangmenghu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
红舟流星: 金币+1, 欢迎来到生物功能材料板块应助交流 2012-09-08 15:30:55
红舟流星: 金币+1, 代扣代发金币 2012-12-09 00:50:15
哦，这个是操作的问题了，我以前自己也弄过这个仪器，不过现在已经不动手了，Hela和MCF-7做细胞周期肯定是没有问题的，这两种细胞我都养过，如果你们那边操作人员不懂，建议你自己做好样品以后，可以委托公司测定，很便宜，这种细胞周期的检测是很简单的
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8楼2012-09-08 11:49:16
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赖皮狗31350

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by jiangmenghu at 2012-09-08 11:49:16
哦，这个是操作的问题了，我以前自己也弄过这个仪器，不过现在已经不动手了，Hela和MCF-7做细胞周期肯定是没有问题的，这两种细胞我都养过，如果你们那边操作人员不懂，建议你自己做好样品以后，可以委托公司测定， ...

好的  谢谢您
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天道酬勤
9楼2012-09-09 10:07:20
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panzhiyuan01

铁虫 (小有名气)
楼主能不能把结果的图像发出来让我看看
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oneday,iwillbecomethemanwhoyoulovetruely
10楼2014-02-24 12:02:49
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