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ROXYgao

铁虫 (初入文坛)

[求助] 流式细胞处理检测 LSK细胞 已有1人参与

各位大神,求指导,之前做流式测小鼠骨髓 LSK细胞,老是出现处理后细胞形态不对?不知道是否处理方法不对还是试剂有问题, 求有相关经验的前辈指导步骤,日过可以的话,分享一下试剂配方(抗体稀释液和保存液)
不甚感激啊!
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不困于情,不念过往,不畏未来,just. keepmoving,be better.yourself!
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我听五月天

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


ROXYgao: 金币+1, 有帮助 2014-03-20 19:57:27
楼主你看看自己的“前辈指导步骤”后面的句子不忍直视好吗!
还有楼主把实验说的在详细些吧,比如细胞养了48小时还是72小时做的流式?状态是流式之后才变的?可以的话贴上变化前后的照片~只能帮你到这儿了~请叫我红领巾
为爱而生
2楼2014-03-15 11:25:24
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ROXYgao

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 我听五月天 at 2014-03-15 11:25:24
楼主你看看自己的“前辈指导步骤”后面的句子不忍直视好吗!
还有楼主把实验说的在详细些吧,比如细胞养了48小时还是72小时做的流式?状态是流式之后才变的?可以的话贴上变化前后的照片~只能帮你到这儿了~请叫 ...

手误伤不起啊,多谢楼主指出!
对了 我们的细胞是直接从小鼠股骨冲出来的骨髓细胞, 然后经过流式抗体染色,检测LSK细胞比例,不知道楼主是否也用LSK, 有的话求处理方法
不困于情,不念过往,不畏未来,just. keepmoving,be better.yourself!
3楼2014-03-17 19:31:17
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

lsk以前常做,还有什么LT  ST MPP 什么的,天津血研所,老程,查查!!
先过磁珠,再过流式,不然会分的时间太长
收集管用血清洗一下,细胞掉下来,不会摔死
你能冲出多少,一只,有10的8吗?要是没有,那细胞太少了,做一次实验得杀多少啊?
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
4楼2014-03-17 20:44:08
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

试剂 货号 克隆号  问下血研所那边,我离开了,有些不方便说,
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
5楼2014-03-17 20:45:26
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

小程整理的:
lin-  2-5  ;  
lsk-  0.1
lsk+ 0.05-0.1
其他的比例你问那边吧,人家总结的,我不好都給散了

下面是maker,研究的“牛”,你找文献,就知道抗体是什么,怎么配的色,克隆号了
Weissman, I. L.            LSK flk2
Morrison, S. J.               SLAM(2005 cell)
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
6楼2014-03-17 20:51:49
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我听五月天

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ROXYgao at 2014-03-17 19:31:17
手误伤不起啊,多谢楼主指出!
对了 我们的细胞是直接从小鼠股骨冲出来的骨髓细胞, 然后经过流式抗体染色,检测LSK细胞比例,不知道楼主是否也用LSK, 有的话求处理方法...

sorry,没有做过呢。流式我都没做过
为爱而生
7楼2014-03-18 13:31:35
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