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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 生物制药 » 杂交瘤细胞培养
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changyi_23

金虫 (小有名气)

[求助] 杂交瘤细胞培养 已有2人参与

本人最近刚开始培养杂交瘤细胞，遇到有很多难题，刚复苏的细胞（半贴壁半悬浮）状态一天天变差会是哪些原因造成的呢，换夜的时候总是离心对细胞的伤害大吗？（800rpm,5min）谢谢各位啦~
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1楼 2014-11-12 08:52:21
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livein合肥

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
changyi_23: 金币+12, ★★★很有帮助 2015-01-04 16:56:27
杂交瘤细胞其实是比较好培养的，参照常规的杂交瘤细胞培养方法或者ATCC上的方法基本就可以（比如1640+10%NCS+抗生素），离心后复苏的细胞比较脆弱，建议第二天半换液培养，当然如果细胞量很少则继续培养，起初细胞量比较少不建议离心。状态差可以适当提高NCS的含量（15%）、添加HT等。
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2楼2014-12-18 14:26:00
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changyi_23

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by livein合肥 at 2014-12-18 14:26:00
杂交瘤细胞其实是比较好培养的，参照常规的杂交瘤细胞培养方法或者ATCC上的方法基本就可以（比如1640+10%NCS+抗生素），离心后复苏的细胞比较脆弱，建议第二天半换液培养，当然如果细胞量很少则继续培养，起初细胞量 ...

本人刚刚接触杂交瘤细胞的培养 目前手头上有一株奇葩细胞 复苏之后换夜、传代 传了两代左右 细胞状态就会越来越差 试验过几次 前一天细胞状态很好 第二天培养基突然变黄 是不是污染了 或者第二天即使培养基没有变黄，但是细胞也会死了 这是怎么回事呢 求解呀
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3楼2015-01-04 16:56:42
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张陨雪

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

培养基变黄就是要换新鲜培养基了，换液的话要半量换液，尽量不要把培养细胞的环境改变太大。杂交瘤细胞复苏后特性容易发生变化，有经验的人也说不敢随便冻存
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4楼2015-11-18 13:25:48
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